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(优选)血球计数板的使用 本文档共39页;当前第1页;编辑于星期三\17点17分 ①血球计数板的原理和构造 ②方法与步骤 本文档共39页;当前第2页;编辑于星期三\17点17分 ①血球计数板的原理和构造 Ⅰ构造 血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器,由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。 本文档共39页;当前第3页;编辑于星期三\17点17分 本文档共39页;当前第4页;编辑于星期三\17点17分 中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网。方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室。这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其容积为0.1mm3,即1mm×1mm×0.1mm方格的计数板。 本文档共39页;当前第5页;编辑于星期三\17点17分 1mm×1mm×0.1mm=0.1mm3 20mm×20mm×0.25mm=100mm3 本文档共39页;当前第6页;编辑于星期三\17点17分 25×16型的计数板 计数池中央的大格又被双线划分成25个中格,其中的每个中格又被单线划分成16个小格,中央大方格由25×16=400个小方格组成。 本文档共39页;当前第7页;编辑于星期三\17点17分 在血球计数板上,刻有一些符号和数字(见图一),其含义是:XB-K-25为计数板的型号和规格,表示此计数板分25个中格;0.10mm为盖上盖玻片后计数室的高;1/400mm2表示计数室面积是1mm2,分400个小格,每小格面积是1/400 mm2。 本文档共39页;当前第8页;编辑于星期三\17点17分 把中央大方格的中方格再分成小方格的分割线并不只局限于中央大方格内,而是一直延伸到正方形凹槽的边缘,所以在其延长线上的4个大方格中分割线显得密集。 本文档共39页;当前第9页;编辑于星期三\17点17分 本文档共39页;当前第10页;编辑于星期三\17点17分 25×16型的计数板一般计数四个角和中央的五个中方格(5×16=80个小方格)的细胞数。 本文档共39页;当前第11页;编辑于星期三\17点17分 Ⅱ血球计数板的原理 本文档共39页;当前第12页;编辑于星期三\17点17分 计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算, 对每个样品计数三次,再取其平均值。 N1=(n1-1+n1-2)/2 N2=(n2-1+n2-2)/2 N=(N1+N2+N3) /3 N3=(n3-1+n3-2)/2 本文档共39页;当前第13页;编辑于星期三\17点17分 N1=(n1-1+n1-2)/2 计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算。 n1-1 n1-2 N1=(n1-1+n1-2)/2 本文档共39页;当前第14页;编辑于星期三\17点17分 N2=(n2-1+n2-2)/2 计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算。 n2-1 n2-2 N2=(n2-1+n2-2)/2 本文档共39页;当前第15页;编辑于星期三\17点17分 N3=(n3-1+n3-2)/2 计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算。 n3-1 n3-2 N3=(n3-1+n3-2)/2 本文档共39页;当前第16页;编辑于星期三\17点17分 将计数板及盖玻片用流水冲洗,擦干,重复上述步骤,对每个样品可计数三次,再取其平均值。 N1=(n1-1+n1-2)/2 N2=(n2-1+n2-2)/2 N=(N1+N2+N3) /3 N3=(n3-1+n3-2)/2 本文档共39页;当前第17页;编辑于星期三\17点17分 将同一样品的计数结果,取平均值。代入下式,求算单胞藻的密度: N小格平均每小格内的细胞数=N/(5×16) 设每毫升中有x个单胞藻 x个 N小格×16×25个 1cm3 (1mm × 1mm × 0.1mm÷1000)cm3 x个 = N/(5×16) ×16×25个 1cm3 (1mm × 1mm × 0.1mm÷1000)cm3 x = N/(5×16) ×16×25个× 1cm3 × 1000÷ (1mm × 1mm × 0.1mm) =50000 N 本文档共39页;当前第18页;编辑于星期三\17点17分 ②用血球计数板对藻细胞进行计数的方法与步骤: ⅰ检查计数室 先用显微镜对计数板的计数室进行镜检是否干净。若有污物,则需用清水清洗,吹干,用擦镜纸擦拭干净。 盖玻片使用前浸在75%的酒精溶液中,使用时用眼科镊取出,放在滤纸
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