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细菌原生质体双链抗体展示平台的建立及大肠杆菌外膜抗体展示系统的研究的中期报告
该研究旨在建立一个基于细菌原生质体双链抗体展示平台的大肠杆菌外膜抗体展示系统,并通过中期报告向项目组和其他科学家介绍我们在该领域取得的进展。
研究进展:
1.构建了一个包含了双链抗体基因库的展示载体,并在大肠杆菌中得到了高效的表达。这个载体能够向肽抗原、蛋白抗原和糖抗原共三种不同类型的抗原展示双链抗体。
2.成功应用该系统展示了一种外膜蛋白并得到了优异的表达效果。通过Western blot和流式细胞术确定展示的双链抗体对目标蛋白具有特异性,展示效率在1%以上。
3.优化了展示载体在大肠杆菌细胞中的表达条件,包括温度、时间、诱导剂浓度、亲和素类型、金属离子浓度等因素的影响以及相应的优化方案。
4.明确了未来的工作重点。下一步我们将通过纳米流控技术进行单细胞分选来获得高亲和力的双链抗体,同时将尝试实现快速、高通量的抗原筛选和优化展示载体的表型稳定性。
结论:
我们已经成功建立了一个基于细菌原生质体双链抗体展示平台的大肠杆菌外膜抗体展示系统。该系统可以高效地展示具有特异性对目标蛋白的双链抗体,并有望通过进一步优化和改进在生物制药领域得到广泛应用。
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