DB65T 4666-2023牛羊布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验鉴别诊断方法.docxVIP

ICS 65.020.30 DB65CCS B 41 DB65 新 疆 维 吾 尔 自 治 区 地 方 标 准 DB 65/T 4666—2023 牛羊布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验 鉴别诊断方法 A differential identification method of native hapten agar gel immuno-diffusion test for brucellosis of bovine and sheep 2023-07-20发布 2023-09-20实施 新疆维吾尔自治区市场监督管理局 发 布 I DB 65/T 4666—2023 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站提出。 本文件由新疆维吾尔自治区畜牧兽医局归口并组织实施。 本文件起草单位：新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站、新疆畜牧科学院兽医研究所(新疆畜牧科 学院动物临床医学研究中心)、中国动物卫生与流行病学中心、青岛瑞尔唯特生物技术有限公司。 本文件主要起草人：李岩、刘丽娅、易新萍、田莉莉、曹瑞、马晓菁、金庭辉、屈勇刚、叶锋、剡 文亮、钟发刚、施远翔、张家瑞、张力、焉鑫、殷涛、宋洁、张旭、张子荣、连晓春、何立雄。 本文件实施应用中的疑问，请咨询新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站。 对本文件的修改意见建议，请反馈至新疆维吾尔自治区畜牧兽医局(乌鲁木齐市天山区新华南路408 号)、新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站(乌鲁木齐市米东区米东南路2188号红光雅居7号公建楼)、 新疆畜牧科学院兽医研究所(新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心) (乌鲁木齐市新市区冬融街726 号)、中国动物卫生与流行病学中心(青岛市市北区南京路369号)、新疆维吾尔自治区市场监督管理 局(乌鲁木齐市新华南路167号)。 新疆维吾尔自治区畜牧兽医局联系电话：0991-8568089;传真：0991-8527722;邮编：830004 新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站联系电话：0991-4641759;传真：0991-4641759;邮编：830021 新疆畜牧科学院兽医研究所(新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心)联系电话：0991-3098109; 传真：0991-3098109;邮编：830013 新疆维吾尔自治区市场监督管理局联系电话：0991-2818750;传真：0991-2311250;邮编：830004 1 DB 65/T 4666—2023 牛羊布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验鉴别诊断方法 1 范围 本文件规定了牛羊布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验方法的术语和定义、生物安全要求、仪器、设 备和试剂、检测步骤及结果判定的要求。 本文件适用于新疆维吾尔自治区范围内布鲁氏菌A19-△VirB12株、 A19 株和M5 株疫苗免疫区牛羊 布鲁氏菌病血清学检测。天然半抗原琼脂扩散试验适用于牛羊免疫2个月后，可鉴别区分布鲁氏菌疫苗 A19-△VirB12株、A19 株和M5 株免疫抗体与感染抗体。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 GB/T18646 动物布鲁氏菌病诊断技术 GB 19489 实验室生物安全通用要求 NY/T 541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 布鲁氏菌天然半抗原琼脂扩散试验 native hapten agar gel immuno-diffusion test (NH-AGID) 布鲁氏菌外膜光滑型脂多糖 (S-Lipopolysaccharide,S-LPS) 和天然半抗原 (Native Hapten,NH) 是布鲁氏菌抗原中重要的两种检测标识物。 S-LPS 是布鲁氏菌的一种优势抗原，疫苗免疫接种或感染布 鲁氏菌均会刺激动物机体产生S-LPS 抗体。而NH 抗原在布鲁氏菌活动期或排菌期可持续刺激动物机体 产生NH 抗体， NH 抗体的产生与布鲁氏菌活动性感染密切相关。应用NH-AGID 试验中NH 沉淀线，可鉴 别区分布鲁氏菌疫苗免疫动物与感染动物，并判定布鲁氏菌在感染动物体内的活动(排菌)状态。 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 NH: 天然半抗原 (Native Hapten) S-LPS: 光滑型布鲁氏菌脂多糖 (Smooth Lipopolysaccharide) NH-AGID: 天然半抗原琼脂扩散试验 (Native hapten Agar Gel Immuno