DB65T 4644-2023固废纺织原料中大肠埃希氏菌的快速检验方法.docxVIP

ICS 59.080.99 CCS W09 新 疆 维 吾 尔 自 治 DB65 区 地 方 标 准 DB 65/T 4644—2023 固废纺织原料中大肠埃希氏菌的 快速检验方法 Rapid detection method of Escherichia coli in solid waste textile materials 2023-07-20发布 2023-09-20 实施 新疆维吾尔自治区市场监督管理局 发 布 DB 65/T 4644—2023 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由乌鲁木齐海关提出。 本文件由乌鲁木齐海关归口并组织实施。 本文件起草单位：乌鲁木齐海关技术中心、成都海关、新疆师范大学、新疆环疆绿源环保科技有限 公司。 本文件主要起草人：巴哈提古丽.马那提拜、刘俊、巩志国、王种、高沙尔.卡依尔哈力、刘冬志、 塔伊尔 · 买买提江、万永亮、王静静、房芳、 张伟、车娟、王洁、 白梅花、王斌、范伟功、谢伟、张 飞宇、刘秀玲。 本文件实施应用中的疑问，请咨询乌鲁木齐海关海关技术中心。 对本文件的修改意见建议，请反馈至乌鲁木齐海关技术中心(乌鲁木齐市南湖北路116号)、 乌鲁 木齐海关(乌鲁木齐市北京南路295号)、新疆维吾尔自治区市场监督管理局(乌鲁木齐市新华南路167 号 ) 。 乌鲁木齐海关技术中心联系电话：0991-3616817; 邮编： 830063 乌鲁木齐海关 联系电话：0991- 3267855; 邮编：830011 新疆维吾尔自治区市场监督管理局联系电话：0991-2817197: 邮编：830004 II DB 65/T 4644—2023 引 言 目前大多固废纺织原料加工过程中仅靠添加抗菌剂和防腐剂来抑制其携带的微生物的增殖，并不 能全面有效杀死其携带的有害微生物， 因此固废类纺织原料存在较大的生物安全隐患。 经查资料和调研，受到污染的固废纺织原料可能携带感染性和致病性较强的大肠埃希氏菌。微生物 常规培养和分离方法费时费力， 操作复杂，周期较长。为快速检验固废纺织原料中的大肠埃希氏菌， 特制定本文件。 1 DB 65/T 4644—2023 固废纺织原料中大肠埃希氏菌的 快速检验方法 1 范围 本文件规定了固废纺织原料中大肠埃希氏菌 (Escherichia coli) 的术语和定义、缩略语、原理、 设备和材料、培养基和试剂，描述了检验程序、操作步骤、结果报告的方法。 本文件适用于固废纺织原料中大肠埃希氏菌的快速检验。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本 文件。 GB 4789.6 食品安全国家标准食品微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验 GB 19489 实验室生物安全通用要求 GB/T 27403 实验室质量控制规范食品分子生物学检测 SN/T 4835 实验室生物废弃物管理要求 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 固废纺织原料 solid waste textile material 天然纤维和化学纤维在纺织生产过程中受到机械作用和化学反应影响，失去原有用途，不能在原生 产工序中继续使用的部分，包括废棉、废棉纱线、废化学纤维、废麻原料、废丝绸原料、废动物毛、 废 矿物纤维等。 4 缩略语 下列缩略语适合于本文件 1) dATP: 脱氧腺苷三磷酸， deoxyadenoside triphosphate 2) dCTP: 脱氧胞苷三磷酸， deoxycytidine triphosphate 3) dGTP: 脱氧鸟苷三磷酸， deoxyguanoside triphosphate 4) dNTP: 脱氧核苷三磷酸， deoxyribonucleoside triphosphate 5) dTTP: 脱氧胸苷三磷酸， deoxythymidine triphosphate 6) EB: 溴化乙锭 7) PCR: 聚合酶链反应， Polymerase chain reaction 8) Taq 酶： Taq DNA 聚合酶 9) TE:Tris-EDTA 缓冲液 2 DB 65/T 4644—2023 10)uidA: β-葡萄糖醛酸酶基因， β- glucuronidase gene 5 原理 利用大肠埃希氏菌发酵乳糖产酸产气、特异性生物酶β -葡萄糖醛酸酶(β - glucuronidase)、 分 解 5 溴-4 氯-3-吲哚基- β-D-葡萄糖醛酸苷环己