杀虫蛋白基因cry8Fa2的克隆及在Bt无晶体突变株中的表达的中期报告.docxVIP

杀虫蛋白基因cry8Fa2的克隆及在Bt无晶体突变株中的表达的中期报告 本研究中，使用PCR和RT-PCR技术从Bacillus thuringiensis（Bt）菌株中克隆了一段约1.5 kb的杀虫蛋白基因cry8Fa2序列，并通过测序验证了其完整性和正确性。进一步通过基因结构分析和同源性比对，确认该序列属于cry8Fa2亚型。 为了进一步研究cry8Fa2基因的功能，我们将其在Bt晶体毒株中构建并表达。首先，通过重组子克隆和酶切连接技术将cry8Fa2基因序列插入到pHT2表达载体中，然后将重组的pHT2-cry8Fa2载体转化到Bt无晶体突变株中。 接下来，通过PCR扩增和Western blotting检测cry8Fa2基因在转化菌株中的表达情况。结果显示，cry8Fa2基因在转化菌株中成功表达，并且其产物经过SDS和Western blotting检测结果显示蛋白质大小符合预期的大小。 综合来看，在本研究中我们成功克隆了cry8Fa2基因，并且实现了在Bt无晶体突变株中的表达，为后续研究Bt菌株中杀虫蛋白基因的功能和分子机制提供了基础数据。