鸡毒支原体伴侣蛋白GroEL生物活性检测及免疫特性研究的中期报告.docxVIP

鸡毒支原体伴侣蛋白GroEL生物活性检测及免疫特性研究的中期报告 本研究旨在对鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum，简称MG）伴侣蛋白GroEL进行生物活性检测及免疫特性研究。目前已完成的工作包括： 1. GroEL基因的克隆和表达 首先，我们从MG H strain菌株中扩增了GroEL全长基因（1839 bp），并将其克隆到pET28a载体中。然后，在大肠杆菌BL21中利用IPTG诱导表达GroEL蛋白，并通过Ni-NTA亲和层析纯化获得了高表达的重组GroEL蛋白，其分子量约为66 kDa。 2. GroEL生物活性的检测 为了检测GroEL蛋白的生物活性，我们利用了细菌钩端旋螺体的运动能力作为指标。具体来说，我们将GroEL蛋白添加到体外培养的细菌钩端旋螺体中，通过观察旋螺体的运动状态来判断GroEL是否对细菌的运动能力产生影响。结果表明，添加GroEL后，旋螺体的运动能力显著降低，表明GroEL对细菌的运动能力产生了明显的抑制作用。 3. GroEL蛋白的免疫特性分析 为了进一步了解GroEL蛋白的免疫学特性，我们利用ELISA测定了GroEL蛋白的抗原性。具体地，我们将GroEL蛋白包被在96孔板上，用鸡血清对其进行反应，通过比较GroEL包被组和对照组的光密度值来评估GroEL蛋白的抗原性。结果表明，GroEL蛋白可以作为鸡MG感染的潜在抗原，具有一定的免疫学特性。 目前，我们已完成了GroEL蛋白的表达、生物活性检测和免疫学特性分析。接下来，我们将进一步探究GroEL与鸡MG感染的关系，对其相关机理进行深入研究。