鸡SelW过表达CHO-K1细胞系的构建及其抗氧化功能的研究的中期报告.docxVIP

鸡SelW过表达CHO-K1细胞系的构建及其抗氧化功能的研究的中期报告 本研究旨在构建稳定的鸡SelW基因过表达CHO-K1细胞系，并评估其抗氧化活性。目前已完成以下工作： 1.鸡SelW基因的克隆和序列分析 通过PCR技术从鸡肝细胞中克隆到了鸡SelW基因，并对其进行了序列分析。结果表明，鸡SelW基因共含有368个氨基酸，具有典型的硒蛋白家族保守结构域。 2.构建鸡SelW过表达质粒并转染CHO-K1细胞 将鸡SelW基因克隆到质粒pEGFP-C1中，并通过脂质体转染的方法将其转导到CHO-K1细胞中。经过对转染细胞的筛选和确认，成功构建了稳定的鸡SelW过表达CHO-K1细胞系。 3.鸡SelW基因过表达对CHO-K1细胞抗氧化能力的影响 利用DCFH-DA荧光染色法检测了鸡SelW过表达CHO-K1细胞系中ROS的生成情况。结果表明，在H2O2刺激下，与野型CHO-K1细胞相比，鸡SelW过表达CHO-K1细胞系生成的ROS显著减少，表明鸡SelW基因的过表达可以提高CHO-K1细胞对氧化应激的抗性。 综上所述，我们成功构建了稳定的鸡SelW基因过表达CHO-K1细胞系，并发现其具有显著的抗氧化活性，这为进一步研究鸡SelW在氧化应激中的作用机制奠定了基础。