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- 2023-10-20 发布于上海
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卵巢癌人源单链抗体库的构建及功能蛋白的筛选的中期报告
本研究旨在构建一种用于筛选卵巢癌特异性功能性单克隆抗体的人源单链抗体库,并通过筛选获得能够识别并结合卵巢癌细胞表面特异抗原的功能蛋白。目前研究已完成了以下工作。
1. 卵巢癌细胞株的筛选和培养
选用了多种卵巢癌细胞株,包括SKOV-3、OVCAR-3、Hey、ES-2和A2780等。其中,SKOV-3和OVCAR-3细胞株具有较高的恶性程度和易于生长的特点,是本研究的主要研究对象。这些细胞株均采用适宜的培养条件进行培养。
2. 单链抗体库的构建
本研究基于重组技术构建了一组包括约2×10^8个单链抗体的人源单链抗体库。库中单链抗体基因通过PCR扩增和突变后,插入到表达载体中进行表达。
3. 特异性筛选
为筛选出能够识别并结合卵巢癌细胞表面特异抗原的功能蛋白,我们采用了筛选抗体的流程,包括细胞免疫反应、ELISA、细胞免疫染色和蛋白质印迹等技术。截至目前,我们已完成针对SKOV-3细胞的三轮筛选,初步获得了8株生物学活性较高的单克隆抗体。
目前我们正在对这些单克隆抗体进行详细的分子特性研究和生物学功能鉴定,将其应用于卵巢癌的诊断和治疗。
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