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拟南芥AtDsbA活性研究及底物蛋白的捕获的中期报告
本研究主要针对拟南芥（Arabidopsis thaliana）中的一种重要的氧化还原蛋白AtDsbA进行活性研究和底物蛋白的捕获实验。AtDsbA是一种硫氧还蛋白，其在拟南芥中扮演着重要的催化氧化蛋白质的角色。在本次实验中，我们利用蛋白质纯化技术和酵母双杂交技术来研究AtDsbA的活性及其底物蛋白与其之间的相互作用。
首先，我们对AtDsbA进行了纯化，得到了较高纯度的重组蛋白。通过对AtDsbA的活性检测，我们发现其在还原环境下具有更高的活性，且其活性受到氧化剂DTNB的明显抑制。这表明AtDsbA确实具有催化氧化反应的能力，且其催化过程可能受到氧化还原平衡的调控。
接下来，我们利用酵母双杂交技术筛选了AtDsbA的潜在底物蛋白。通过对筛选出的阳性克隆进行测序和生物信息学分析，我们发现其中包含一些已知的氧化还原蛋白以及一些未知的蛋白。我们还利用GST pull-down实验和共沉淀实验对筛选出的底物蛋白进行了验证，结果显示其中一些蛋白与AtDsbA确实存在相互作用。
综上所述，本次研究初步揭示了AtDsbA的活性和底物蛋白之间相互作用的一些特征。未来我们将进一步探究AtDsbA底物蛋白的作用机制，并尝试利用这些底物蛋白来揭示AtDsbA在拟南芥氧化还原调控中的作用。
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