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超顺磁性氧化铁携载Uc-MSC干预CIA大鼠炎症反应的研究的中期报告
本研究旨在探讨超顺磁性氧化铁(USPIO)携载Umbilical cord-derived mesenchymal stem cells(Uc-MSC)干预大鼠类风湿性关节炎(CIA)炎症反应的效果。研究进行至中期,我们已经完成了以下重要工作:
1. 实验动物:选用雄性SD大鼠,将其随机分为3组:对照组、CIA组和治疗组。CIA组和治疗组均注射胞壳菌素(Collagen type II)诱导CIA模型。
2. 细胞贴壁培养:将新鲜提取的Uc-MSC进行三代细胞培养,检测表面标记CD29、CD44、CD73、CD90和CD105表达,并证实其应具有多潜能的分化能力。
3. 超顺磁性氧化铁携载:通过化学共沉淀法将USPIO与细胞包裹在一起,制备USPIO-Uc-MSC复合物,并通过紫外–可见光谱法测定其纳米粒子尺寸、Zeta电位和包载率。
4. 大鼠尾静脉注射:治疗组大鼠尾静脉注射USPIO-Uc-MSC复合物,其它两组注射等体积的PBS缓冲液。
5. 细胞迁移实验:通过Transwell实验,证明Uc-MSC对小鼠淋巴结上皮细胞(HEK-293T)有良好的迁移能力。
下一步,我们将继续进行以下实验操作:基于ELISA技术检测各组大鼠的关节炎指数、炎症介质TNF-α、IL-1β和IL-6水平;组织学检查大鼠关节的损伤情况;Western blot检测各组大鼠关节周围组织中相关蛋白的表达。最终希望能够证实USPIO-Uc-MSC复合物对CIA大鼠炎症反应的干预效果,为CIA治疗提供新的思路。
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