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血型判定操作规程
一.玻片法(仅合用于正定型)
.原理:
1.1依据红细胞上有无A抗原或(和)B抗原,能够将红细胞血型分为A型、B型、AB型和O型。依据抗-A和抗-B抗体与对应红细胞的凝聚反响,能够判定ABO血型。
1.2依据抗-D抗体与对应红细胞抗原的凝聚反响,区分RhD阳性和RhD阳性。
.标本收集:
用EDTA抗凝管收集被检对象静脉血,充分混匀,保证抗凝充分。紧迫状况下能够使用抗凝动脉血。婴幼儿及其余不便于真空管采血的患者,如不进行反定型试验可收集末梢血。
标本运送与储藏:
收集好的标本与申请单同期赶快(一般2小时内)送往输血科。标本收集后和检测后,应置于2~8℃环境下。检测后的标本应起码保留7天,以备结果核对。
.仪器与资料:
抗-A/B血型定型试剂(单克隆抗体)、RhD(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)、载玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
操作步骤:
5.1用标志笔在载玻片上区分红A、B、D三个地区;
5.2在标志好的玻片上分别加1滴抗-A、抗-B和抗-D血型定型试剂;
5.3再各加1滴10%患者红细胞悬液(该红细胞悬液能够是盐水悬液,也能够是悬浮于自己血浆或血清中的红细胞);
5.4用干净的搅拌棒将红细胞悬液和试剂充分混淆,并把混淆物平均涂开,使其覆盖大概直径20mm的面积;
5.5迟缓连倾斜摇动玻片1-2min,察看结果并记录。
结果判断:
6.1凝聚或发生溶血为阳性结果;
6.2细胞混匀2min后仍呈悬液状态的为阴性结果;
6.3对结果有思疑,应用试管法或微柱凝胶法重复实验。
二、纸板法
.原理:
1.1依据红细胞上有无A抗原或(和)B抗原,能够将红细胞血型分为A型、B型、AB型和O型。依据抗-A和抗-B抗体与对应红细胞的凝聚反响,能够判定ABO血型正定型。A1细胞上含有A和A1抗原,B细胞上含有B抗原。用已知的A、B细胞检测被检者血清中有无相应的抗-A或抗-B抗体,即反定型。综合正反定型结果确立受检标本ABO血型。
1.2依据抗-D抗体与对应红细胞抗原的凝聚反响,区分RhD阳性和RhD阳性。
.标本收集:
用EDTA抗凝管收集被检对象静脉血,充分混匀,保证抗凝充分。紧迫状况
下能够使用抗凝动脉血。婴幼儿及其余不便于真空管采血的患者,可收集末梢血。
标本运送与储藏:
收集好的标本与申请单同期赶快(一般2小时内)送往输血科。标本收集后
.
和检测后,应置于2~8℃环境下储藏。检测后的标本应起码保留7天,以备结果核对。
.仪器与资料:
抗-A/B血型定型试剂(单克隆抗体)、RhD(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)、血型判定专用纸板、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
操作步骤:
5.1取干净五孔血型判定专用纸板,做好姓名标志;
5.2按纸板表记向每孔中分别加入相应试剂抗A、抗B、抗D血清各1滴以及受检者血清各2滴;
5.3各孔中分别加入受检者红细胞适当及相应所需3-5%A型、B型试剂红细胞(自制或商品化试剂)并搅匀,使其覆盖直径15-20mm的面积;
5.4轻轻旋转摇摆混匀,直到形成平均的细胞悬液或凝聚块,边摇边察看;
5.53min以上记录结果。记录察看到的凝聚程度或溶血程度。
结果判断:
6.1凝聚或发生溶血为阳性结果;
6.2细胞混匀2min后仍呈悬液状态的为阴性结果;
6.3对结果有思疑,应用试管法或微柱凝胶法重复实验。
三、试管法
.原理:
1.1依据红细胞上有无A抗原或(和)B抗原,能够将红细胞血型分为A型、B型、AB型和O型。依据抗-A和抗-B抗体与对应红细胞的凝聚反响,能够判定ABO血型正定型。A1细胞上含有A和A1抗原,B细胞上含有B抗原。用已知的A、B细胞检测被检者血清中有无相应的抗-A或抗-B抗体,即反定型。综合正反定型结果确立受检标本ABO血型。
1.2依据抗-D抗体与对应红细胞抗原的凝聚反响,区分RhD阳性和RhD阳性。
.标本收集:
用EDTA抗凝管收集被检对象静脉血,充分混匀,保证抗凝充分。紧迫状况下能够使用抗凝动脉血。婴幼儿及其余不便于真空管采血的患者,如不进行反定型试验可收集末梢血。
标本运送与储藏:
收集好的标本与申请单同期赶快(一般2小时内)送往输血科。标本收集后和检测后,应置于2~8℃环境下储藏。检测后的标本应起码保留7天,以备结果核对。
.仪器与资料:
抗-A/B血型定型试剂(单克隆抗体)、RhD(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)、一次性试管、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
操作步骤:
5.1ABO血型正定型试验
取两支干净试管,做好标志,按试管标志向试管中加入抗
-A、抗-B血
清各1滴;
向每管中各加入1滴3-5%被检红细胞盐水(血清或血浆)悬液;
轻轻混淆试管内容物,1000g离心15s;
结果判断:将试管拿成锐角,迟缓倾斜,使液体经过细胞扣,当细胞
.
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