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                HIV-1整合酶随机突变库的构建的中期报告
我们正在进行HIV-1整合酶随机突变库的构建,以便研究突变对整合酶活性和耐药性的影响。该项目的中期报告包括以下进展:
1. 构建DNA文库:我们使用PCR技术扩增了整合酶基因,并将其克隆到质粒载体中。然后,在随机位置插入NNN序列来构建随机突变库。目前我们已完成了DNA文库的构建,文库中含有超过20万个突变序列。
2. 测序分析:我们对文库中的随机序列进行Sanger测序,并使用生物信息学分析软件对测序数据进行了处理。我们发现文库中的随机序列覆盖广泛,且多样性高。
3. 酶活性测定:我们正在进行对随机文库中突变酶的活性筛选,目前已经完成了一部分的初步筛选。我们使用了常规的荧光底物测定法来评估突变酶的整合活性。
4. 耐药性测定:我们还将测试突变酶对常见整合抑制剂的抗性程度,以评估突变对抗药性的影响。
总结:目前,我们已经构建了HIV-1整合酶随机突变库,并且进行了初步的测序分析和酶活性筛选。接下来,我们将进行更深入的突变酶活性和耐药性测试,以便进一步研究整合酶的结构和功能。
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