实验四、氨基酸纸电泳分离鉴定.docVIP

实验四、氨基酸纸电泳分离鉴定 一、目的要求 通过电泳分离氨基酸，了解氨基酸的性质以及电泳分离技术的应用。 一、实验原理 带电粒子(胶体或分子)在直流电场作用下，能向异性电极迁移，这种现象称为电泳。带电粒子之所以能在电场的作用下迁移，是因为在一定PH环境条件下，不同的物质所带的电荷种类、数量不同，在一定的电场作用下，就以不同的速度向不同的电极方向移动，从而达到分离混合物和鉴定未知物的目的。带电粒子在电场内移动的方向及电泳速度，除取决于粒子的分子量和电荷量外，还与电场强度、溶液PH、缓冲溶液的离子强度以及电渗等因素有关。 电泳是离子在电场中通过介质的移动，按支持介质的不同可分为:(1)纸电泳:以滤纸、玻璃纤维等为支持物。(2)凝胶电泳:以聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶、淀粉凝胶等为支持物。(3)薄膜电泳:醋酸纤维素为支持物。氨基酸分离选用滤纸为支持介质进行电泳。 氨基酸在水溶液中通常解离成两性离子，它在酸性和碱性介质中的变化可用下式表示: HHCHCOORRCHCOORCHCOOHOHOH NHNH32NH3 在酸性介质中，氨基酸主要以阳离子状态存在，电泳时向阴极移动;在碱性介质中，氨基酸主要以阴离子状态存在，电泳时向阳极移动，当介质的PH值为氨基酸的等电点时，氨基酸以中性偶极离子存在，电泳时不向阴阳电极移动。 实验在pH=5.9的缓冲溶液中进行，一张被PH5.9缓冲溶液所湿润