双向调控整合素α5、β1表达对人主动脉血管平滑肌细胞增殖及迁移的影响的中期报告.docxVIP

双向调控整合素α5、β1表达对人主动脉血管平滑肌细胞增殖及迁移的影响的中期报告 本研究探究了双向调控整合素α5、β1的表达对人主动脉血管平滑肌细胞（HASMCs）增殖和迁移的影响，以下是中期报告。 实验设计 1.实验组织 将新鲜的人主动脉组织放置于含PBS和抗生素的生理盐水中，用剪刀将其切成3mm * 3mm的小块，然后将其放置于0.1%的胰酶-0.02%的EDTA的消化液中，消化2小时。将单个HASMC分离并培养在DMEM中，含10%FBS和1%抗生素。 2. 细胞分组 将HASMCs分为以下四组： - 对照组：不加入任何药物 - ILK siRNA组：使用siRNA抑制HASMCs中ILK的表达 - shRNA组：使用shRNA沉默HASMCs中ITGA5和ITGB1的表达 - ITGA5和ITGB1联合表达组：将ITGA5和ITGB1转染至HASMCs中表达 3. 实验操作 - 细胞增殖实验：将HASMCs均匀分布在96孔板中，每孔5000个，每隔24小时用MTT法测定细胞的增殖率。 - 细胞迁移实验：将HASMCs均匀分布在96孔板中，每孔5×10^4，静置4小时使其附着，然后加入20ng/ml的bFGF和特定浓度的siRNA或shRNA各50μl，每隔24小时观察和记录细胞迁移情况。 预期结果 - 通过siRNA抑制ILK可降低HASMCs的增殖和迁移 - 使用shRNA