分子生物学--蛋白质的生物合成课件.pptxVIP

Protein Biosynthesis 蛋白质的生物合成 主要内容 ®概述 ®遗传密码 ®tRNA ®核糖体 ®蛋白质的生物合成过程 ®一般特征 ®原核生物 ®真核生物 ®蛋白质的运输和翻译后修饰 二、蛋白质的生物合成过程 氨基酸活化 两个前提： 核糖体解离 (二)蛋白质生物合成的过程 核糖体解离 氨酷-tRNA合成酶 氨基酸 + tRNA 氨酷- tRNA ATP AMP＋PPi 氨基酸活化 第二步： 氨酰-tRNA合成酶 氨基酰-AMP＋ tRNA 氨酰-tRNA ＋ AMP 氨酰-tRNA合成酶将氨基酸装载到tRNA上的过程 氨酷-tRNA的表示方法： Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet ®肽链起始(Initiation) ®肽链延伸(Elongation) ®肽链终止(Termination) 1.起始信号： ®起始密码子多数是AUG ，少数是GUG。 ®SD序列：起始密码子的上游约10个核苷 酸的地方往往有一段富含嘌呤的序列。 ®SD序列与核糖体16S rRNA 3’端的核苷酸 序列互补，可促使核糖体与mRNA的结合。 肽链的起始 (1) tRNAf Met 带上Met后能甲酰化，是起始 tRNA ，用于肽链合成的起始。 (2) tRNAmMet 带上Met后不能甲酰化，在肽链 延伸中起作用。 2种可携带Met的tRNA The structure of fMet-tRNA f Differences with other tRNAs SD sequence inactive 70S ribosome 30S initiation complex GDP + Pi 70S initiation complex ®进位 ®成键 ®移位 肽链的延伸 延长因子EFTu和EFTs催化进位 ® 肽酰tRNA由A位移到P位 ® 空载的tRNA进入 E位。 ® 核糖体沿mRNA的5ˊ→3ˊ方向移动一个密码子的距离。 需GTP和延伸因子G(EFG) 3.移位 进 位 移 位 成键 ®RF1识别UAA 、UAG， ®RF2识别UAA 、UGA。 ®RF3协助肽链释放。 肽链的终止和释放 1.终止信号的识别：有三种蛋白因子 2. 肽链释放：释放因子使肽酰转移酶活性转变为 水解活性，并释放tRNA ，然后核糖体离开。 (三)真核生物蛋白质合成的过程 1. 核糖体： 更大， 80S ，可解离成60S和40S。 2. 起始tRNA： 二种携带Met的tRNA： ®起始tRNA : 即tRNAiMet ，携带 Met后，并不甲酰化。 ®用于肽链内部的tRNAMet。 3.起始密码子： vAUG ，上游无SD序列，通常mRNA上最靠近5’ 端的AUG为起始部位。 v40S核糖体与mRNA 5’端帽子结合，向3’方向移动， 搜索AUG密码子，这过程要消耗ATP。 4.起始因子 ® 命名为eIF-n ® eIF-3 ：与40S亚基结合，使大小亚基解离； ® eIF-2 ：与Met-tRNAiMet及GTP结合； ® eIF-4 ：与mRNA的帽子结合。 ® eIF-5 ：释放起始因子， 使核糖体亚基结合 真核生物mRNA翻译的起始 1. 80S核糖体解离 2.形成Met- tRNAiMet.eIF-2.GTP三元复合物 Met- tRNA Met.eIF-2.GTP elF-2 + 3 1 4C 40S Met- tRNA Met GTP Met 40S 60S 60S 6 i i mRNA 3 1 40S Met Met- tRNA Met.eIF-2.GTP 4. 40S前起始复合物结合mRNA 3.形成40S前起始复合物 Met + + 3 1 40S 3 1 40S Met 4C 4C 4C i Met eIF-5 GDP+Pi 各种elF释放 60S 40S AUG Met 复合物对mRNA进行滑动搜索，寻找起始 密码子AUG 5.生成80S起始复合物 3 1 40S 3 40S Met Met AUG 4C 4C 1 搜索AUG Met AUG 真核生物翻译起始 复合物形成过程 Met elF-2 -GTP - Met-tRNAiMet ATP ADP+Pi 各种elF释放 GDP+Pi Met Met met 6、1、4C mRNA eIF-3、 ④ ③ ② ① 原核生物和真核生物翻译起始的比较 ® 原核：mRNA先与小亚基