日本血吸虫细胞选择培养与用SV40大T抗原基因转染的研究的中期报告.docxVIP

日本血吸虫细胞选择培养与用SV40大T抗原基因转染的研究的中期报告 该研究旨在研究日本血吸虫的细胞选择培养和利用SV40大T抗原基因转染的方法。 研究方法： 选择从感染日本血吸虫的小鼠肝脏中分离出的成体日本血吸虫卵进行实验。首先，通过密度梯度离心法将卵分离，然后以Penicillin-Streptomycin（PS）溶液来消毒。然后，将卵用无菌PBS（Phosphate Buffered Saline，磷酸盐缓冲盐水，PH7.4）洗涤三次。随后，取2 mL的PBS，再加10%的FBS（Fetal Bovine Serum，胎牛血清）来制备PBS/FBS液。再使用Percoll，将混合液离心至1500 g，5min。取上部细胞沉淀，用LBSS（L-15基础液）来清洗。 接下来，将清洗的细胞分装到6孔板中，添加SV40大T抗原基因进行转染。转染后，分别使用Real-time PCR和Western blot方法来检测细胞的SV40基因表达和蛋白质表达水平。 研究结果： 实验结果显示，经过筛选的细胞具有较好的细胞培养特性。同时，转染后的细胞表达了SV40大T抗原基因，并且能够表达其编码的蛋白质。此外，利用Western blot检测还显示了抗原蛋白在细胞内的表达，并且转染后，细胞的生长迅速。 结论： 本研究成功地筛选出了适宜生长的日本血吸虫细胞，并成功地将SV40大T抗原基因转入细胞中，