基因工程的工具课件.pptxVIP

DNA重组技术的基本工具 生长快、肉质好的转基因 鱼(中国) 乳汁中含有人生长激素的 转基因牛(阿根廷) 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 操作环境 生物体外 操作对象 基因 操作水平 DNA分子水平 基本过程 剪切----拼接----导入----表达 结果 人类需要的基因产品 基因工程的概念： 资料分析： 位于费城托马斯 ·杰斐逊大学的希拉里和她的 同事成功地将人体狂犬病抗体的基因移入烟草作物 中。 转基因烟草作物可以产生一种人体蛋白质， 而这种物质能抗击致命性的狂犬病病毒。 • 此转基因实验实现了哪种生物的哪些性状在另外 哪种生物中表达？ • 性状的表达与我们从前学过的什么过程有关？ • 1、将人体狂犬病抗体的基因切割下来。 • 2、将该基因整合到烟草的DNA分子上。 DNA重组技术的基本工具： 基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、 拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。 进行基因操作最少需要以下三种工具： • 准确切割DNA的工具(“分子手术刀”) —— 限制性核酸内切酶(又叫：限制酶) • DNA片段的连接工具(“分子缝合针”) —— DNA连接酶 • 基因转移工具(“分子运输车”) ——基因进入受体细胞的载体 一、限制性核酸内切酶 • 从哪里可以找到这种切割外来的DNA 而对自身不切割的物质？ 原核生物 • 科学家已经找到多少种这种酶？ 迄今已从近300种微生物中分离出4 000种限制酶。 • 这种酶具有什么作用？ 限制酶的作用： 1.能识别特定核苷酸序列； 2.将特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 思考： 限制酶具有什么特性？ 限制性核酸内切酶 重播 黏性末端和平末端 两种不同的末端是如何形成的？ 思考： • 在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种 生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例？ • 现今存在的原核生物为什么没有在长期的进化 过程中被外源DNA的入侵而灭绝，仍能保持一 种稳定状态？有什么保护机制？ • 怎样才能使外来的DNA失效从而保护自身？ 二、 DNA连接酶 将切断的DNA片段与受体细胞的DNA 连接： 分子缝合针──DNA连接酶 连接酶的作用是： 限制酶切割后有两种不同的结果，一种 产生黏性末端，一种产生平末端。那么恢 复它们的连接时，所用DNA连接酶是否可 以不加选择？ 思考：两种DNA连接酶的来源与作用部 位的区别。 DNA连接 酶 DNA聚合酶 D NA 单链 片段 磷酸二 将单个核苷酸加到 已存在的核酸片段 的末端上，形成磷 酸二酯键 连接部 位 在两DNA 之间形成 酯键 总结： 作用于磷 酸二酯键 的酶有哪几种？ 思考： DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同和 不同点？ 链 双链 连接 常用的运载体： 质粒、 λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 最常用的是：质粒。(概念) Ø假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎 样？ Ø作为载体没有切割位点将怎样？ Ø 目的基因是否进入受体细胞，你如何察觉？ Ø如果载体对受体细胞有害将怎样？ 有标记基因的存 在，将来可用含 氨苄青霉素的培 养基鉴别。 但真正用作载体的质粒，都是经过人工改造的。 能复制并带着插 入的目的基因一 起复制 有切割位点 练习 不属于质粒被选为基因运载体的理由是 D A、能复制 B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA • 在基因工程中，切割运载体和含有目的基因 的DNA片段，需使用( A ) A. 同种限制酶 B. 两种限制酶 C. 同种连接酶 D. 两种连接酶 (1)其中①和 是由一种限制酶切割形成的末端， 两者要重组成一个DNA 分子，所用DNA连接酶通常 是 。 (2) 和 是由另一种限制酶切割形成的 末端，两者要形成重组DNA片段，所用的连接酶通常 。 反馈练习： 以下是两种限制酶切割后形成的DNA片段，试分析： ② … AATTC … G ④G … CTTAA … ③ …GC …CG ①GC… CG… 是 基因工程是在DNV分子水平上进行设计施工 的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基 互补配对的步骤是 ( CC)) V、人工合成目的基因 B、 目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、 目的基因的检测和表达 基因工程常用的受体细胞有( ) (1)大肠杆菌 (2)枯草杆菌 (3)支原体 (4)动植物细胞 A. (3)(4) B. (1)(2)(4) C. (2)(3)(4) D. (1)(2)(3)