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黄瓜CDPK基因的克隆及遗传转化的中期报告
黄瓜CDPK基因克隆及遗传转化研究已经进入中期,目前工作进展如下:
1. 黄瓜CDPK基因的克隆
通过PCR扩增及基因库筛选,在黄瓜(Luff)整株cDNA基因库中定向克隆到了黄瓜CDPK基因,该基因长度为1968bp,推测编码655个氨基酸。进一步的序列分析表明,黄瓜CDPK基因属于Ser/Thr蛋白激酶家族,具有保守的CaM结合区域和CDPK特有的激酶结构域,结构与其他物种CDPK基因高度保守。
2. 黄瓜CDPK基因的定量表达
通过RT-qPCR技术,对黄瓜CDPK基因在不同组织和干旱胁迫下的表达情况进行了分析。结果表明,黄瓜CDPK基因在根、叶、茎等组织中均有表达,且在叶中表达量较高。同时,在干旱胁迫下,黄瓜CDPK基因的表达量显著增加,表明该基因可能参与了黄瓜干旱胁迫响应的过程。
3. 黄瓜CDPK基因的遗传转化
利用农杆菌介导的方法,将黄瓜CDPK基因导入到黄瓜愈伤组织中,经过筛选、PCR等分子生物学技术的验证,成功获得了黄瓜CDPK基因转化后的愈伤组织和愈伤植株。接下来,将进行对转基因愈伤组织和植株的生长发育、抗逆性等方面的分析。
综上,目前已经克隆到了黄瓜CDPK基因,并对其在黄瓜中的表达及干旱胁迫响应进行了初步分析,同时也完成了该基因的遗传转化。接下来将继续开展深入的研究,为揭示黄瓜CDPK基因在干旱胁迫响应上的作用及机制提供理论依据和支持。
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