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调控成熟胰岛β细胞增殖和功能的microRNA及其调控机制研究的中期报告
本研究的目的是探讨在调控成熟胰岛β细胞增殖和功能中发挥关键作用的microRNA及其调控机制。在研究的前期,我们已经完成了以下工作:
1. 对胰岛组织和单个胰岛β细胞分离和鉴定,我们使用胰蛋白酶的消化方法分离出高纯度的胰岛组织和单个胰岛β细胞,并使用细胞表面标记CD44、CD49f和CD24进行测定鉴定,确认单个分离的β细胞的纯度达到90%以上。
2. 筛选关键的microRNA,我们首先通过文献资料的综合分析和实验方法的预实验,在百余个miRNA中筛选出了20个有潜力发挥重要调控作用的microRNA,如miR-375,miR-7a,miR-17-5p等。
3. 观察microRNA对β细胞增殖和功能的作用。我们分别转染选定的microRNA mimics和inhibitors到胰岛β细胞中,并借助多种实验手段(如CCK-8、MTT、流式细胞术等)评价β细胞增殖和细胞周期进程,结果发现miR-375能够促进胰岛β细胞的增殖、减轻细胞凋亡并增强细胞周期进程。
总体来说,我们的前期工作着重于筛选出关键的microRNA,并研究这些microRNA对β细胞增殖和功能的影响。在下一步,我们计划进一步深入探讨这些microRNA的调控机制,例如在表观遗传水平上的调控和miRNA与mRNA之间的交互作用。我们相信,通过这些研究,能为治疗糖尿病和胰岛β细胞再生提供新的思路和方法。
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