dna提取与分离的方法改进.docxVIP

dna提取与分离的方法改进 1 案例数据 1.1 魏某强奸,被魏某阴道框架侵害 陈某，25岁，女性。2011年3月, 报警称其前一日在某花园被魏某强奸, 提取陈某阴道拭子及魏某血样等相关物证送检 (案发后, 陈某冲洗了身体且使用洗衣粉清洗了内裤) 。 1.2 无女性阴道上皮细胞的培养 剪取陈某阴道拭子和内裤裆部检材置于1mL离心管内, 加入TNE 1 000μL, 浸泡30min, 使用抗人精斑检测试剂条检测, 结果显示均为阴性, 镜检均未发现精子细胞。 大面积剪取陈某阴道拭子和内裤裆部分别置于8个1mL离心管内, 加入TNE 1 000μL, 10mg/mL蛋白酶K 60μL, 56℃保温4h且增加震荡次数。镜检无女性阴道上皮细胞。经8 500rpm离心5min, 弃上清;分别加入1 000μL超纯水, 重复上述震荡离心过程2次后, 分别向8个离心管中的沉淀物加入100μL超纯水, 震荡后将离心管中溶液收集至1个离心管内, 8 500rpm离心5min, 弃上清向管中沉淀加100μL裂解液 (Lysis Buffer 1mL +1mol/mL DTT 5μL) , 75℃保温30min。加入7μL DNA IQTMSystem 试剂盒中的硅珠, 静置5min, 磁力架分离, 参照试剂盒操作手册继续, 最终加入30μL洗脱液进行洗脱。 采用Identifiler-Plus扩增试剂