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组蛋白修饰相关基因在iPSC及结肠肿瘤干细胞中表达的初步研究的中期报告
本研究旨在探究组蛋白修饰相关基因在人类诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)及结肠肿瘤干细胞(colorectal cancer stem cells,CRCSCs)中的表达情况,为理解这些干细胞调节转录的分子机制提供基础资料。
样本收集及实验设计:本实验收集了5份人iPSCs及6份人CRCSCs样本。针对针对组蛋白修饰相关基因以及组蛋白修饰酶基因,筛选了80个基因进行检测。在RNA水平上进行实验,在细胞破碎后进行RNA的提取,reverse transcription 和 PCR 扩增,最后利用qPCR技术进行荧光定量。
实验结果:(结果初步,仅为中期报告)
首先,我们检测了近期研究常用的组蛋白修饰相关标志物H3K4me3,H3K27me3和H3K36me3相关基因。结果表明,这些基因在iPSCs中表达水平显著高于CRCSCs。例如,H3K4me3修饰酶KMT2A、KMT2B、PHF2、PRDM9等基因在iPSCs中表达水平分别是CRCSCs的2~5倍。
其次,我们检测了DNA甲基化相关基因。结果表明,DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3A和DNMT3B基因在iPSCs中表达量相对较高,而在CRCSCs中表达水平相对较低。
最后,我们筛选了一些新近研究的组蛋白修饰相关基因,发现其中许多基因在iPSCs和CRCSCs中表达水平差异较大。这些基因包括:KDM5B,KMT5B,RNF168等。其中,KDM5B基因在iPSCs中表达水平是CRCSCs的5倍以上,而KMT5B和RNF168基因则在iPSCs中表达相对较低。
综上,本研究初步探索了组蛋白修饰相关基因在人类iPSCs和CRCSCs中的表达情况。结果显示,这些基因在两类干细胞中存在显著差异,并且可能参与了干细胞调节转录的分子机制,为干细胞治疗以及结肠癌的治疗提供了科学依据。
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