米毛盘菌YM218胞外多糖深层发酵及抗肿瘤活性研究的中期报告.docxVIP

米毛盘菌YM218胞外多糖深层发酵及抗肿瘤活性研究的中期报告 本研究旨在通过深层发酵培养条件的优化和多种分离纯化方法的比较，获得高产多糖的米毛盘菌YM218发酵液，并研究其抗肿瘤活性。 第一步，通过单因素实验和正交试验确定了适合米毛盘菌YM218生长和多糖产生的最佳培养条件为：初始pH值为7.0，初始培养基体积为5 ml，温度为35 ℃，转速为150 rpm，培养时间为72 h。在此条件下，米毛盘菌YM218发酵液中多糖产量达到2.16 g/L，显著高于其他条件组的产量。 第二步，采用四种方法分别进行米毛盘菌YM218多糖的纯化，包括酸沉淀法、乙醇沉淀法、脱蛋白法和凝胶渗透色谱法。结果表明，凝胶渗透色谱法具有最好的纯化效果，占总糖量的85.93％，其次是酸沉淀法和乙醇沉淀法，然后是脱蛋白法。 第三步，采用CCK-8细胞检测法评价各纯化方法得到的米毛盘菌YM218多糖的抗肿瘤活性。结果表明，凝胶渗透色谱法纯化的米毛盘菌YM218多糖对肝癌细胞HepG2表现出最强的抗增殖活性，其半数抑制浓度（IC50）为51.42 μg/mL，而酸沉淀法、乙醇沉淀法和脱蛋白法纯化的米毛盘菌YM218多糖对HepG2增殖的抑制作用较弱。同时，在MCF-7和A549细胞株中，凝胶渗透色谱法纯化的米毛盘菌YM218多糖也表现出一定的抗增殖活性。 综上，本研究成功获得了高产多糖的米毛盘菌YM218发酵液，并通过凝胶渗透色谱法得到了高纯度的多糖，并证明了其具有一定的抗肿瘤活性，为该多糖的进一步研究和开发具有重要意义。