重金属铅人工抗原的制备与纯化及抗体免疫检测体系的建立的中期报告.docxVIP

重金属铅人工抗原的制备与纯化及抗体免疫检测体系的建立的中期报告 中期报告： 一、研究背景 重金属铅是一种广泛存在于环境中的污染物，在工业生产和日常生活中均有大量使用，尤其是在某些行业中，如电池制造等，铅的污染问题更加突出。长期暴露在铅污染环境下的人体会出现各种健康问题，如贫血、神经系统问题等。因此，建立一种可靠的铅污染检测方法具有重要的现实意义。 人工抗原是指人工合成的对抗体能够产生特异性识别的分子。通过人工合成抗原可以制备出高抗原性的化合物，便于制备专业抗体，为检测特定物质提供了方便。因此，使用人工合成的重金属铅抗原可以制备高品质的铅污染检测抗体。该研究旨在建立一套重金属铅抗原制备纯化及抗体免疫检测体系，以满足铅污染检测的需求。 二、研究进展 1. 抗原制备 首先，我们通过文献综述筛选了多个可能作为重金属铅抗原的化合物，最终选择了DTPA和EDTA作为抗原的前体材料，并采用两步法进行合成反应。首先，我们用二溴乙烷将DTPA二钠和EDTA二钠进行双季铵盐化反应，得到二季铵盐。接着，用硫酸与金属铅进行反应，得到重金属铅，并将其与二季铵盐反应，得到了重金属铅抗原。 2. 抗原纯化 为了提高铅抗原的纯度和亲和力，我们使用Ni-NTA树脂进行亲和层析纯化。初步结果表明，纯化后抗原的比色法检测值相比于未纯化的组别显著提高。 3. 免疫检测体系的建立 我们初始化了一套铅抗原的ELISA检测方案，通过调整试剂浓度等参数，逐步优化操作步骤。目前，比色法和光学检测测定铅离子的敏感性和特异性均经历了严格检测。 三、下一步计划 1. 采用RP-HPLC和电泳等方法进一步分离纯化抗原。 2. 优化免疫检测体系的检测参数，并提高检测灵敏度。 3. 开展实际环境样品的检测，验证检测体系的可靠性。 四、结论 通过本次研究，我们初步建立了一套重金属铅人工抗原制备、纯化、检测的体系。此方法具有采用简单的化学物质制备抗原，具有缩小间隔及相对简单的操作流程。并在未来可扩展至其他重金属元素的检测应用。