自噬体相关蛋白p62抑制AAV2转导U87细胞的效应和机制探讨的中期报告.docxVIP

自噬体相关蛋白p62抑制AAV2转导U87细胞的效应和机制探讨的中期报告 自噬是一种维持细胞稳态的重要代谢途径，其中 p62 是一个自噬体相关蛋白，可以通过与多种蛋白相互作用来参与自噬过程。先前研究已经表明，AAV2病毒颗粒具有通过自噬途径进入宿主细胞的能力。但目前尚未了解p62在AAV2进入细胞过程中的作用。因此，本研究旨在探讨p62对AAV2转导U87细胞的影响以及其机制。 在实验中，我们采用 CRISPR/Cas9 技术分别敲除了U87细胞中的 p62 和 Atg5 基因。通过 Western blotting 分析，证实了 p62 和 Atg5 基因的有效敲除。接下来，我们将AAV2病毒颗粒加入到 U87 细胞培养基中进行转染，然后采用定量 PCR 检测 GFP 基因与其他参考基因的表达情况，比较了p62和Atg5敲除细胞与野生型细胞的转染效率。 结果显示，p62敲除细胞中AAV2的转染效率明显降低，而Atg5敲除细胞和野生型细胞之间无明显差异。这表明p62可以促进AAV2的转染，但Atg5与此过程没有明显的关联。 接下来，我们通过荧光共聚焦显微镜观察AAV2在U87细胞中的定位以及与p62的相互作用。结果表明p62与AAV2结合存在，AAV2可以通过自噬途径进入U87细胞，并且p62参与了这一过程。 综上，本实验初步证明了p62可以促进AAV2的转染，并且参与了AAV2进