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氨甲酰基促红素的制备及其对过氧化氢损伤的SH-SY5Y细胞保护作用的观察的中期报告
本次实验旨在制备氨甲酰基促红素并探究其对过氧化氢损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用。
一、实验方法
1.1 制备氨甲酰基促红素
以8mg促红素为起始物，加入50μl 3M的苯甲酸酐溶液和50μl三甲基氨基甲烷（pH=8）缓冲液，于室温下反应24小时。反应结束后用50%乙酸水溶液进行酸化，得到氨甲酰基促红素并用高效液相色谱仪进行验证。
1.2 SH-SY5Y细胞培养
采用DMEM培养基给SH-SY5Y细胞培养并在37℃、5% CO2的条件下孵育，待细胞密度达到80%以上时，洗涤1次并加入适量氨甲酰基促红素。
1.3 细胞实验
将细胞分为3组：对照组、氢氧化钠损伤组和氨甲酰基促红素治疗组。对照组细胞只加入培养基，氢氧化钠损伤组细胞加入0.5mM氢氧化钠，氨甲酰基促红素治疗组细胞加入0.5mM氢氧化钠和5μg/ml氨甲酰基促红素。将细胞于37℃、5% CO2的条件下孵育24小时，加入MTT后在37℃条件下孵育4小时并用ELISA读板机检测各组细胞的存活情况。
二、实验结果
2.1 氨甲酰基促红素的制备
利用高效液相色谱仪验证，氨甲酰基促红素的纯度达到97.3%。
2.2 氨甲酰基促红素对细胞的保护作用
实验结果表明，在氢氧化钠诱导的损伤下，氨甲酰基促红素处理组的细胞存活率显著高于氢氧化钠损伤组的细胞存活率（P0.05），说明氨甲酰基促红素可以对SH-SY5Y细胞产生保护作用。
三、结论
本次实验成功制备了氨甲酰基促红素并探究其对过氧化氢损伤的SH-SY5Y细胞的保护作用。实验结果表明，氨甲酰基促红素可以降低氢氧化钠诱导的细胞损伤，对细胞产生保护作用。
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