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甘油磷酸胆碱的分离纯化、结构表征及其质量研究的中期报告
本实验的主要目的是对甘油磷酸胆碱进行分离纯化、结构表征及其质量研究。在中期阶段,我们完成了以下工作:
1. 甘油磷酸胆碱的提取和初步分离
首先,将鸡肝均匀切成小块,并用75%的福尔马林液固定4小时,然后用去福尔马林液洗涤,直至油脂被完全去除。接下来,将去脂的鸡肝加入100 mM的甘氨酸缓冲液中,并用高压均质器打碎。然后通过超声波水浴处理两次,每次处理2分钟。随后用0.45微米滤膜过滤,离心沉淀,得到鸡肝提取物粗制液。
通过鸡肝提取物粗制液,我们利用Ion Pac AS11-HC-4毛细管电泳柱进行离子交换色谱分离,以纯化甘油磷酸胆碱。初步分离结果表明,甘油磷酸胆碱的谱峰显然分离出来且质量较好,但还需要进一步纯化。
2. 继续纯化甘油磷酸胆碱
通过对初步分离的甘油磷酸胆碱进行进一步纯化,我们选择了高效液相色谱法进行分离。我们使用C18分离柱、乙腈/水等价的溶液作为流动相,并以254 nm处的最大吸收峰作为监测波长。通过进一步纯化,我们成功地获得了高纯度的甘油磷酸胆碱。
3. 结构表征甘油磷酸胆碱
对纯化后的甘油磷酸胆碱进行结构分析,我们使用利用质谱、核磁共振等技术进行了分析。从质谱分析结果来看,甘油磷酸胆碱的分子量为537.3 Da,分子式为C26H55NO7P。同时,核磁共振也验证了其各个结构单元的组成和相对位置。
4. 进一步研究甘油磷酸胆碱的生物功能和质量控制
在得到高纯度甘油磷酸胆碱后,我们通过一系列生化试验进行了甘油磷酸胆碱的生物活性分析,其中包含对其抗氧化能力、抗炎能力、抗肝损伤能力的分析。此外,我们也对甘油磷酸胆碱的质量进行了严格的控制,以确保产品达到相关质量标准。
以上是本实验的中期报告,我们将在后续的实验中继续深入探究甘油磷酸胆碱的性质和应用。
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