水溶性脂聚体运载siRNA沉默NMDA受体1基因的实验研究的中期报告.docxVIP

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水溶性脂聚体运载siRNA沉默NMDA受体1基因的实验研究的中期报告 该研究采用水溶性脂聚体(SLP)作为载体,运载siRNA沉默NMDA受体1基因的表达,旨在探究其对神经元的保护作用。经过前期实验的筛选和优化,确定了适宜的siRNA浓度、转染体积和转染时间,并确定sba.siRNA-2为最佳siRNA。本阶段实验主要包括以下部分: 一、封装SLP/sba.siRNA-2复合物 通过电镜观察SLP/sba.siRNA-2复合物的形态和粒径大小,结果表明SLP/sba.siRNA-2复合物呈现规则的球形结构,平均粒径约为150 nm。 二、细胞毒性实验 通过MTT法测定不同浓度(0, 10, 25, 50, 100, 200 μg/mL)的SLP/sba.siRNA-2复合物对PC12细胞的毒性,结果表明在100 μg/mL时细胞存活率仍然高达85%以上。 三、转染实验 通过荧光显微镜观察SLP/sba.siRNA-2复合物的转染效果,结果表明复合物成功地转染到PC12细胞中,并实现了siRNA沉默作用。同时,Western blotting分析结果显示,siRNA对NMDA受体1基因的表达有明显的沉默作用。 综上所述,本阶段实验表明SLP可以作为一种有效的siRNA载体,成功地运载siRNA沉默NMDA受体1基因,在PC12细胞中实现了siRNA的沉默作用。下一步的研究将进一步验证SLP/sba.siRNA-2复合物对NMDA受体1基因表达的沉默作用是否能够在大鼠脑内得到应用。

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