T_CVDA 3-2022 动物埃博拉病毒中和抗体检测技术.docxVIP

学兔兔　ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ　标准下载ICS?11.220 学 兔 兔 　ｗ ｗｗ ．ｂ ｚｆ ｘｗ ．ｃ ｏｍ 　标 准 下 载 B?41  T/CVDA 团?体?标?准 T/CVDA?3—2022 动物埃博拉病毒中和抗体检测技术 Detecting?technique?of?neutralization?antibody?against?Ebola?virus?in?animals 2022?-?07?-19?发布 2022?-?07?-?25?实施 中国兽药协会?发布 I 学兔兔　ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ　标准下载目录 学 兔 兔 　ｗ ｗｗ ．ｂ ｚｆ ｘｗ ．ｃ ｏｍ 　标 准 下 载 前言 ? III 1? 范围 ? 4 2? 规范性引用文件 ? 4 3? 缩略语 ? 4 4? 试剂和材料 ? 4 5? 器材和设备 ? 5 6? 动物血清 ? 5 6.1? 安全防护 ? 5 6.2? 血清采集 ? 5 7? PRNT? 实验操作 ? 5 7.1? 安全防护 ? 5 7.2? 材料准备 ? 5 7.2.3? 细胞 ? 6 7.2.4? 血清灭活 ? 6 7.3? 检测操作 ? 6 7.3.1? 对照设置 ? 6 7.3.3? 病毒与血清中和 ? 6 7.3.4? 接种细胞 ? 6 8? 结果观察与判定 ? 7 8.1? 观察顺序 ? 7 8.2? 荧光观察结果判定 ? 7 8.2.2? 结果判定与效价计算? ? 7 附录? A ? 8 A.1? 磷酸盐缓冲液（ PBS ）? ? 8 A.2? 含? 10% 胎牛血清的? DMEM? 培养液? ? 8 A.3? 含? 2% 胎牛血清的? DMEM? 培养液? ? 8 A.4? 细胞分散液? ? 8 附录? B? ? 9 B.1? 材料和试剂? ? 9 B.2? 方法? ? 9 B.2.1? 嵌合? EBOV? GP? 蛋白重组水泡性口炎病毒的构建与拯救 ? 9 B.2.2? 重组病毒的传代? ? 10 B.2.3? 重组病毒鉴定? ? 10 B.2.4? 重组病毒的毒价测定? ? 10 II 学兔兔　ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ　标准下载前 言 学 兔 兔 　ｗ ｗｗ ．ｂ ｚ ｆｘ ｗ． ｃ ｏｍ 　 标 准 下 载 本标准参照GB?/T?1.1-2020给出的规则起草。 本标准中国兽药协会提出并归口管理，由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所起草。 本标准主要起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、东北林业大学、哈尔滨国生生物科技股 份有限公司。 本标准主要起草人：步志高、王翀、温志远、葛金英、柴洪亮、刘霄磊。 本标准为首次发布。 III 学兔兔??标准下载 学兔兔　ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ　标准下载动物埃博拉病毒中和抗体检测技术 学 兔 兔 　ｗ ｗｗ ．ｂ ｚｆ ｘｗ ．ｃ ｏｍ 　标 准 下 载 1 范围 本标准规定了用于动物埃博拉病毒血清中和抗体测定的实验操作方法及结 果判定标准。 本标准适用于动物血清中埃博拉病毒中和抗体的定性检测和定量测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适 用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T?6682?2008?分析实验室用水规格和试验方法 GB?19489?2008?实验室生物安全通用要求 GB?/T?1.1-2020?标准化工作导则?第1部分：标准化文件的结构和起草规则 3 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 EBOV：埃博拉病毒（Ebola?virus）； Vero?E6：非洲绿猴肾细胞（African?green?monkey?kidney?cell）； VSVΔG-EBOVGP-EGFP：表达绿色荧光蛋白的埃博拉病毒糖蛋白GP嵌合水泡性口炎病 毒； TCID50：半数组织培养感染量（Tissue?Culture?Infective?Dose）； PRNT：噬斑减少中和试验（plaque-reduction?neutralization?test）； BSL-2：生物安全2级实验室（Biosafety?Laboratory?Level-2）； BSL-4：生物安全4级实验室（Bi