水质检测微生物指标.pptxVIP

2011年 农村饮用水水质微生物 检测技术 微生物指标 · 菌落总数 · 总大肠菌群 · 耐热大肠菌群 一、菌落总数 · 1.方法——平皿计数法 · 2.定义 : 菌落总数（standard plate-count bacteria） 水 样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48h后 ， 所得 1mL水样所含细菌的总数。 厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求的以及非嗜中温的细菌 ， 由于现有条件不能满足其 生理需求 ， 故难以繁殖生长 。 因此菌落总数并不表示实际中的所有细菌总数 ， 菌落总数并 不能区分其中细菌的种类 ，所以有时被称为杂菌数 ， 需氧菌数等。 · 3.主要培养基： 营养琼脂 · 4.主要仪器： 培养箱36 ℃+ 1 ℃等 5.检验步骤 · 生活饮用水 1mL水样+15mL45℃左右琼脂 摇匀 ， 做平行样和空白对照 。冷却后 ， 翻转平板 ， 36 ℃+ 1 ℃培养48h后计数。 · 水源水 先制成1： 10 ， 1： 100等稀释液 ， 再按生 活饮用水的检验步骤进行检验。 注意事项 · （1） 操作要快而准 ， 包括材料 、加样 、倒培 养基。 · （2） 吸液体时液体不能进入吸头。 · （3） 样品稀释时一定要混匀。 · （4） 倒培养基前 ， 瓶口要过火焰。 · （5） 一定要有空白对照。 · （6） 培养基温度控制 ， 培养基薄厚。 6.菌落计数及报告方法 作平皿菌落计数时 ， 可用眼睛直接观察 ， 必要 时用放大镜检查 ， 以防遗漏 。在记下各平皿的菌落 数后 ， 应求出同稀释度的平均菌落数 ， 供下一步计 算时应用 。在求同稀释度的平均数时 ， 若其中一个 平皿有较大片状菌落生长时 ， 则不宜采用 ， 而应以 无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数。 若片状菌落不到平皿的一半 ， 而其余一半中菌落数 分布又很均匀 ， 则可将此平皿计数后乘2以代表全 皿菌落数 。然后再求该稀释度的平均菌落数。 7.不同稀释度的选择及报告方法 ①首选30～300之间进行计算 ， 若只有一个稀释度的平均菌落数 符合此范围时 ， 则将该菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1 实例1） 。 ②若有两个稀释度 ， 其生长的菌落数均在30～300之间 ， 则视二 者之比值来决定 ， 若其比值小于2应报告两者的平均数（见 表1实例2） ， 若大于或等于2则报告其中稀释度较小的菌落 数（见表1实例3 、4） 。 ③若所有稀释度的平均菌落数均大于300 ， 则应按稀释度最高的 平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1实例5） 。 ④若所有稀释度的平均菌落数均小于30 ， 则应按稀释度最低的 平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表1实例6） 。 ⑤若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间 ， 则 应以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报 告之（见表1实例7） 。 ⑥若所以稀释度的平板上均无菌落生长 ， 则以未检出报 告之。 ⑦如果所以平板上都菌落密布 ， 不要用“ 多不可计 ”报 告 ， 而应在稀释度最大的平板上 ， 任意数其中2个 平板1cm2 中的菌落数 ， 除2求出每平方厘米内平均 菌落数 ， 乘以皿底面积63.6cm2 ， 再乘其稀释倍数 作报告。 ⑧菌落计数的报告： 菌落数在100以内时按实有数报告， 大于100时 ， 采用两位有效数字 ， 在两位有效数字 后面的数值 ， 以四舍五入方法计算 ， 为了缩短数字 后面的零数也可用10的指数来表示。 表1 稀释度选择及菌落总数报告方 报告方式 / (CFU/mL) 不同稀释度的平均菌落数 两个稀释度 菌落数之比 菌落总数/ （ CFU/mL ） 式 38000或3.8 ×104 16000或1.6 ×104 27000或2.7 ×104 1500或1.5 ×103 510000或5. 1 ×105 270或2.7 ×102 31000或3. 1 ×104 实例 1500 1.6 2.2 37750 — — 16400 2 27100 — — 513000 — — 270 — — 30500 5 8 513 60 12 10- 3 20 46 164 271 11 10- 2 295 1650 30 305 2890 多不可计 150 10- 1 27 1365 多不可计 2760 4 5 2 3 6 7 1 二、总大肠菌群 · 1.方法—— 多管发酵法（另有滤膜法和酶底物法） · 2.定义 总大肠菌群（total coliforms） 指一群在37℃培养 24h能发酵乳糖、产酸产气、 需氧和兼性厌氧的革 兰氏阴性无芽孢杆菌