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- 2023-11-21 发布于上海
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多顺反子质粒载体重编程脂肪间充质干细胞为诱导多能干细胞的中期报告
本研究的目的是通过基因重编程脂肪间充质干细胞(ASCs)将其诱导为多能干细胞(iPSCs)。
在研究初期,我们使用了多顺反子质粒载体(pCDH)来转染ASCs以表达Oct3/4、Sox2、Klf4和c-Myc,这些基因是iPSCs诱导中所需的因子。结果显示,ASCs形成了紧密的聚集体,并出现了典型的干细胞样式,包括胞质体积缩小和核质比率增加。同时,RT-PCR和免疫荧光染色的结果显示,这些细胞表达了iPSCs标志性基因如Oct3/4、Sox2、Nanog和SSEA-1。
在中期报告中,我们正在进行以下研究:
1. iPSCs的形成
我们正在评估这些转化细胞是否拥有完整的多能性,主要是通过in vitro和in vivo分化实验来确定细胞类型。我们目前已经完成了一些in vitro实验,包括通过激素诱导将iPSCs分化为体细胞系,以及将其分化为神经前体细胞和心肌细胞。这些实验有利于我们评估iPSCs的多能性。
2. 基因表达差异的分析
我们计划使用RNA-seq技术来比较iPSCs和原始ASCs之间的基因表达差异,并进一步阐明iPSCs的重编程机制。
3. 体内效果的分析
我们计划将iPSCs注入小鼠胚胎并观察其体内分化能力。我们也将进行长期随访来确定其体内安全性和治疗效果。
总之,我们的研究旨在建立一种基因重编程AS
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