猪硒蛋白基因TrxR2和Se1H的克隆、表达及抗体制备的中期报告.docxVIP

猪硒蛋白基因TrxR2和Se1H的克隆、表达及抗体制备的中期报告 本实验旨在克隆、表达猪硒蛋白基因TrxR2和Se1H，并制备相应的抗体。 1. 克隆猪TrxR2和Se1H基因 采用PCR方法，利用设计的寡核苷酸引物，在猪肝细胞总RNA中扩增出了约1.4 kb的TrxR2基因的全长cDNA和1.1 kb的Se1H基因的全长cDNA。通过克隆序列分析和测序验证，确认所获得的基因序列的准确性。 2. 表达重组蛋白 将TrxR2的全长cDNA和Se1H的全长cDNA克隆入pET-30a(+)质粒中，在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。通过SDS和Western blotting检测，证实TrxR2和Se1H均被表达出来，并且和预期大小相符。 3. 抗体制备 将纯化的TrxR2和Se1H重组蛋白分别用于免疫BALB/c小鼠制备抗体。通过ELISA检测，证实所得到的抗体对应的免疫球蛋白具有较高的特异性和亲和力。 目前，我们已完成了整个实验的中期工作，顺利获得了TrxR2和Se1H的全长cDNA，并成功表达和纯化了重组蛋白并制备出相应的抗体。接下来将继续对抗体的性质和功能进行进一步分析和应用。