洋葱再生体系建立及原生质体分离条件的筛选的中期报告.docxVIP

洋葱再生体系建立及原生质体分离条件的筛选的中期报告 本场研究旨在建立洋葱再生体系并筛选出适合原生质体分离的最佳条件。以下是中期报告： 一、材料与方法 1.实验材料：普通洋葱（Allium cepa L.）。 2.实验方法： （1）洋葱再生体系建立：取洋葱鳞茎后放入70%的酒精中消毒30s，用流动水冲洗干净后切成小鳞茎片（约0.5cm×0.5cm）。将小鳞茎片分别接种在不同基础培养基（MS，B5，N6等）中并添加不同的激素（BA，NAA，TDZ等）并进行培养。观察培养后洋葱再生体系的形成情况。 （2）原生质体分离条件筛选：取2g新鲜洋葱鳞茎切成小块，加入0.6M蔗糖等滤液（W5，K3等）制备液态培养基，并加入不同浓度的酶解液（cellulase，pectinase，hemicellulase等）进行预处理。随后使用不同浓度的孔隙尺寸（200微米，250微米，300微米等）的滤网进行过滤，筛选出最佳的分离条件。 二、结果与分析 1.洋葱再生体系建立：初步实验表明，在MS培养基中添加0.5mg/L的BA和0.5mg/L的NAA，可以促进洋葱小鳞片的再生和增殖。因此将其作为本次进一步测试的处理组合。 2.原生质体分离条件筛选：根据实验结果，发现使用含有0.6M蔗糖的W5液态培养基，加入0.8%的hemicellulase、1.0%的pectinase和1.2%的cellulase三种酶解液