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- 2023-11-22 发布于中国
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尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳
尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea-polyacrylamide gel electrophoresis,简称Urea)是一种常用于蛋白质或核酸分析的电泳方法。它结合了尿素和聚丙烯酰胺两种物质,用于调节凝胶的性质和分离目标分子。
以下是尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理与步骤:
凝胶制备:将聚丙烯酰胺粉末和尿素加入到凝胶缓冲液中,混合均匀并加热溶解。然后,将溶解的混合物注入到电泳槽中,用相应的梳子创建样品槽和标准槽,使凝胶定形。
样品制备:待凝胶定形后,将待分析的蛋白质或核酸样品与加载缓冲液混合,加热变性使其变成线性构象,然后可以进行加载。
电泳过程:将预处理好的样品加载到凝胶槽中,然后在电泳槽中通入电流,通过电泳力将带电的蛋白质或核酸样品分离到凝胶中。电泳过程中,聚丙烯酰胺提供了凝胶基质,以限制分子的自由扩散,而尿素则在样品中形成变性剂,使蛋白质或核酸在电场中以线性构象进行电泳。
结果分析:电泳完成后,凝胶上的目标蛋白质或核酸会根据其大小、电荷、形状等性质在凝胶中形成不同的迁移带,可以根据此来分析和识别分子、确定其相对分子量或片段大小。
尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的分离与分析技术,常用于研究蛋白质的组分分析、纯化与定性定量,以及核酸的分离和DNA测序等实验。
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