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利用CBE构建三基因缺失PRV毒株的方法和应用.pdfVIP

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  • 2023-11-25 发布于四川
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利用CBE构建三基因缺失PRV毒株的方法和应用.pdf

    本发明公开了利用CBE构建三基因缺失PRV毒株的方法和应用，涉及生物技术领域，选择PRV病毒中gE、TK、gI三基因作为靶标位点，设计sgRNA序列，根据sgRNA上下游序列分别合成单链寡核苷酸，然后退火获得带粘性末端的双链DNA片段，将载体经限制性内切酶酶切后回收片段，再与带粘性末端的双链DNA片段连接，获得连接产物；将连接产物转化至感受态细胞中，涂板筛选培养，挑阳性菌扩大培养，对阳性菌液抽提质粒；将质粒转染，对通过转染获得的病毒进行蚀斑纯化，每一轮均通过PCR扩增与测序的方法进行验证；纯化得

    (19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 117106736 A (43)申请公布日 2023.11.24 (21)申请号 202311385914.X C12N 7/04 (2006.01)

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