第四章_动物细胞工程制药演示文稿.pptVIP

ES细胞成为个体 1.将ES细胞注入到动物的早期胚胎内，可产生嵌合体转基因动物。 本文档共73页；当前第30页；编辑于星期六\12点58分 2.通过核移植将ES导入去核的卵母细胞，在子宫种植发育成个体 本文档共73页；当前第31页；编辑于星期六\12点58分 胚胎干细胞转基因过程 本文档共73页；当前第32页；编辑于星期六\12点58分 1.ES细胞的建立与维持 动物的准备：受精后3.5天的母鼠分离鼠胚。 胚胎的分离和初培养：3.5天孕鼠 鼠断颈处死 解剖小鼠取出胚胎 体外培养胚胎 4-6天 后，离散ICM。 ICM的离散与ES的分离：分离ICM 酶解细胞团 培养离散细胞 ES细胞集落 ES细胞的扩增：离散ES细胞 置四孔培养板中 培养 ES细胞的常规培养：ES细胞由四孔板转至培养皿进 行常规培养 本文档共73页；当前第33页；编辑于星期六\12点58分 2.ES细胞的基因组操作 将外源基因移入到ES细胞基因组后，既能高效稳定表达，又不影响ES细胞的各种功能。 这就要求目的基因必须要定点参入，并且参入整合后，对原有基因结