醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质.pptVIP

醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质;;二、实验原理（一）;二、实验原理（二）;醋酸纤维薄膜电泳可将血清蛋白分成五条主要区带，从正极端起依次为清蛋白/白蛋白Alb， α1-球蛋白，α2-球蛋白，β-球蛋白, γ-球蛋白。这些蛋白经过染色处理，可展示出清晰的蛋白电泳图谱。如下图所示。;由于染色时，染料与蛋白质的结合与蛋白质的量成正比。因此可将实验图片扫描后，根据每个蛋白条带的光密度，采用软件计算每种蛋白质的相对含量。 也可将各蛋白区带剪下，分别用一定量的NaOH稀溶液洗脱，进行比色，测出各蛋白质区带的相对含量。;影响电泳的因素;三、实验器材;醋酸纤维薄膜（CAM,2 cm×8cm）：1片/人。 染色缸1个，公用。 漂洗缸3个，公用。 点样器：公用。 滤纸：公用。 镊子：公用。 ; 脱色摇床; 扫描仪;四、实验试剂;迎着光辨别醋酸纤维薄膜（CAM）的光面和毛面。 在毛面的一端1.5cm处，用直尺和铅笔轻划一横线，做点样标记，并用铅笔标号。 将已经编号、标记的CAM膜以毛面朝下的方式浸入巴比妥缓冲液中，浸泡30 min。;电泳装置由电泳槽和稳压电源两部分组成，两者之间有专门的连线连接。电泳槽的正负极各有一个装缓冲液的槽，红色为正极，黑色为负极。电泳槽置于水平台，两侧注入等量的巴比妥缓冲液，使其在同一水平面。用双层纱布搭桥。;1）用镊子取出浸透的薄膜，夹在两层粗滤纸内吸干多余的缓