EGCG对稳定转染TDP43Q331K的NSC34细胞系的作用的开题报告.docxVIP

EGCG对稳定转染TDP43Q331K的NSC34细胞系的作用的开题报告 引言： TDP-43（TAR DNA binding protein 43）是参与到转录和RNA加工中的一种重要的核酸结合蛋白，在多种人类疾病中与异常聚集有关，如前额颞叶退化症、肌萎缩侧索硬化症（ALS）等。研究表明，TDP-43蛋白异常聚集和纤维化是ALS中的一个特征。因此，研究TDP-43的调控机制及其在ALS中的作用已成为近年来神经退行性疾病研究的热点。 EGCG（表儿茶素3-加孟杂碳酸酯，Epigallocatechin-3-gallate）是绿茶的主要成分之一，以其具有抗氧化、抗癌、抗病毒和抗炎等多种生物活性而受到广泛关注。研究表明，EGCG可以通过多种途径调节脑细胞凋亡、氧化应激、神经递质释放等，具有对神经退行性疾病可能有保护作用。EGCG在ALS中的作用也引起了研究者的广泛关注。 本研究旨在探究EGCG对稳定转染TDP43Q331K的NSC34细胞系的作用，以期解决TDP-43蛋白异常聚集和纤维化导致ALS发病的问题。 研究内容： 1. 构建TDP43Q331K转染的NSC34细胞系模型。 采用慢病毒载体，将TDP43Q331K基因稳定转染到NSC34细胞中，筛选出表达稳定的细胞系，铺平于细胞培养板上，进行后续研究。 2. 检测EGCG对TDP-43聚集和纤维化的影响。 采用免疫荧光法和Western blot法检测TDP-43聚集和纤维化的程度，分析不同EGCG浓度的作用，以期发现EGCG对TDP-43聚集和纤维化的影响以及最佳应用浓度。 3. 研究EGCG对TDP-43表达及细胞凋亡的影响。 采用Real-time PCR法和TUNEL法检测EGCG对TDP-43表达及细胞凋亡的影响，分析不同EGCG浓度的作用，以期发现EGCG对TDP-43表达及细胞凋亡的影响以及最佳应用浓度。 预期结果： 本研究将建立TDP43Q331K转染的NSC34细胞系模型，进一步研究EGCG对TDP-43聚集和纤维化的影响及其对细胞凋亡的影响。预期结果显示，EGCG具有调节TDP-43蛋白异常聚集和纤维化的能力，并可通过抑制细胞凋亡发挥保护作用。本研究将为ALS的病理治疗提供新思路和新方向。