RNAi沉默STAT1对支气管哮喘小鼠气道炎症的调控作用研究的开题报告.docxVIP

RNAi沉默STAT1对支气管哮喘小鼠气道炎症的调控作用研究的开题报告

一、研究背景及意义

哮喘是一种慢性异质性气道疾病，具有气道高反应性、气道狭窄和气流受限等特征，其病理生理学机制尚不清楚。近年来研究表明，STAT1（signaltransducersandactivatorsoftranscription1）在哮喘发病机制中发挥着重要作用。STAT1的激活可导致Th1型细胞分泌过多的IL-12、IFN-γ等细胞因子，进而引发气道炎症反应。

RNAi是利用RNA分子对目标mRNA进行特异性降解，从而抑制某一基因表达的一种技术手段，具有特异性强、效率高、可逆性强等优势。因此，本研究将利用RNAi沉默STAT1，探究STAT1在哮喘小鼠气道炎症中的调控作用，为哮喘的治疗提供新的思路和方法。

二、研究目的与内容

本研究的目的是探究RNAi沉默STAT1对支气管哮喘小鼠气道炎症的影响，故内容包括：

1.构建siRNA表达载体：将siRNA靶向STAT1的序列克隆到载体中，利用电穿孔法将siRNA表达载体导入哮喘小鼠的气道上皮细胞中。

2.鉴定转染效率：利用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白基因表达的强度，借此鉴定siRNA载体的转染效率。

3.分离支气管肺泡灌洗液（BALF）并分析炎症细胞及因子：采用无创性方法分离BALF，显微镜下观察白细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞数量的变化