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DNeasyBloodTissueKit(Qiagen,Hilden,Germany)试剂盒中文操作说明书作者:Allanflying(站内联系TA) 发布:2012-09-11

一．利用DNeasy?BloodTissue试剂盒提取样本总DNA1．前处理：

注意：

石蜡包埋组织的DNA一般小于650bp，还要视样本类型与保存年限而定。

固定剂一般为福尔马林或酒精。不推荐用蛾酸固定的样本。

溶解时间随样本类型和溶解状态而定。

产量视样本类型和保存年限而定。推荐用50-100ul的AE缓冲液洗脱纯化的DNA。

开始前要预热孵化器或水浴锅至37℃，用于操作步骤9）。

石蜡包埋组织的前处理操作步骤：

将小片石蜡包埋的组织（小于25mg）放入2ml离心管中（自备）。

加入1200ul的二甲苯，用力涡旋震荡。

最大转速室温（15-25°）离心5分钟。

移液枪吸去上清。小心不要吸去沉淀。

往沉淀中加1200ul的（96-100%）酒精（目的是洗去剩余二甲苯），轻柔地震荡。

最大转速室温（15-25°）离心5分钟。

移液枪吸去上清。小心不要吸去沉淀。

重复一次步骤5-7。

37°孵育10-15分钟，孵育过程打开离心管盖，直到酒精蒸发干净。

加入180ul的ATL缓冲液，继续提取组织总DNA中的步骤2。