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日本血吸虫核糖体蛋白SjRPS4基因及蛋白联合免疫保护性价值的研究的开题报告
背景:
日本血吸虫病是一种由日本血吸虫寄生引起的慢性肝肠疾病。全球有9亿人感染日本血吸虫,其中50万人患上了日本血吸虫病。目前,防治日本血吸虫病的主要手段是化学药物,但是化学药物的使用存在一些问题,比如有副作用、费用高、易产生药物抗性等。因此,开发一种新的手段来预防和治疗日本血吸虫病非常必要。
研究目的:
本次研究旨在探讨日本血吸虫核糖体蛋白SjRPS4基因及蛋白联合免疫对机体的保护性价值。
研究方法:
1.构建重组表达载体:将日本血吸虫SjRPS4基因进行PCR扩增,将扩增产物克隆至表达载体中。
2.大肠杆菌BL21(DE3)菌株表达蛋白:将重组表达载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,利用IPTG诱导蛋白表达,纯化获得重组蛋白。
3.动物免疫:通过混合蛋白和佐剂制备免疫液,将其注射至小鼠体内,观察小鼠的免疫反应并采集血清。
4.ELISA检测抗体水平:采用ELISA方法检测小鼠血清中对SjRPS4蛋白的抗体水平。
5.小鼠感染日本血吸虫:将感染日本血吸虫的小鼠分为实验组和对照组,实验组注射免疫液,对照组注射PBS。观察两组小鼠的感染情况。
6.病理学检测:采集小鼠肝脏组织,进行病理学检测,比较两组小鼠肝脏组织的病理学改变。
预期结果:
1.成功构建SjRPS4基因表达载体。
2.成功表达SjRPS4蛋白并获得纯化蛋白。
3.免疫小鼠后,获得具有相当免疫效果的抗体,并成功抑制了日本血吸虫的感染。
4.病理学检测结果显示免疫组小鼠肝脏组织的病变程度较轻。
结论:
本次研究结果表明,日本血吸虫核糖体蛋白SjRPS4基因及蛋白联合免疫具有较好的保护性价值。这为开发新的日本血吸虫疫苗提供了一条新途径。
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