上海研域生物详细介绍ELISA试剂盒检测原理！.docVIP

上海研域生物详细介绍ELISA试剂盒检测原理！

ELISA简要操作步骤及原理以双抗体夹心法为例，ELISA简要操作步骤如下：

包被抗体包被到酶标板,加样本/标准品,加生物素标记的检测抗体,加HRP标记的链霉亲和素

加显色底物TMB,加终止液,ELISA试剂盒组分酶标板（Microplate）,酶标板，在ELISA（酶联免疫吸附测定）中作为载体的酶标板对抗原抗体或抗原抗体复合物的吸附起着重要作用。

标准品（Standard）

标准品即为已知浓度的目标物(样本中待测因子)的纯蛋白，对标准品进行梯度稀释，用于制作标准曲线。

生物素标记的检测抗体(DetectedAntibody)

检测抗体即为与目标物特异性结合的抗原/抗体鉴于酶标二抗的局限性，现在厂家一般引入生物素亲和素系统(biotinavidinsystem,BAS)。

洗涤液(WashingBuffer)

长时间的孵育后，会出现非特异性结合，这时就需要洗涤液来洗去非特异性结合的蛋白或抗体。常用的洗涤液有:磷酸盐缓冲液(PBS)、平衡盐缓冲液(BBS)等。

辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(HRP-Streptavidin)

链霉亲和素是Streptomycesavidinii(阿维丁链霉菌)的分泌物。链霉亲和素分子由4条相同的肤链组成，非特异性结合远比亲和素低。在ELISA试剂盒中，用于与检测抗体上的生物素相结合。

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