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重组疫苗E.coliLLO/WT1诱导人树突状细胞成熟及T细胞溶瘤作用研究的开题报告

题目：重组疫苗E.coliLLO/WT1诱导人树突状细胞成熟及T细胞溶瘤作用研究

一、研究背景

乳腺癌、结肠癌等肿瘤在全球范围内成为了影响健康的主要疾病之一。显示目前各类治疗手段都存在局限性，因此研究和发现新的治疗手段变得尤为重要。在肿瘤免疫学中，免疫治疗是一个长期努力发展的领域。研究表明，树突状细胞（DCs）是体内抗原递呈及激活免疫反应的关键细胞。在肿瘤免疫治疗中，研究人们尝试着从不同角度来促进肿瘤抗原特异T细胞杀伤能力，而DCs在该过程中体现出至关重要的作用。疫苗技术被认为是在癌症治疗中应用DCs的最有效方法之一。

二、研究目的

本研究旨在通过搭建表达大肠杆菌内毒素裂解素（LLO）与肿瘤相关抗原WT1融合蛋白的重组载体，制备E.coliLLO/WT1重组疫苗，并探究其对人DCs成熟及激活的影响，同时研究其对T细胞溶瘤作用的影响，并试图探讨其在肿瘤治疗中的潜在作用。

三、研究内容

1.构建重组疫苗载体

通过PCR技术从人肝癌细胞株中扩增WT1基因片段，并将其与LLO基因片段相连，构建LLO/WT1融合基因。然后将重组LLO/WT1基因插入表达载体pET30a(+),并将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达和纯化。

2.体外实验

检测重组LLO/WT1疫苗对人DCs的成熟和激活作用