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酵母提取物对成纤维细胞的作用及抑制黑素生成的研究

1,241,241,3

廖峰,李国光,熊丽,杨海延,李利


(1.四川省化妆品工程技术研究中心四川成都610041;2四川大学化学医院化妆品评价中

心四川成都610041;.3.四川大学华西医院皮肤科四川成都；610041；4.上海辉文生

物技术有限公司，上海201210)

摘要

本文旨在通过细胞实验探索米酒来源酵母提取物（WAE）对成纤维细胞的影响及抑黑

素生成的作用。方法：通过CCK-8法检测成纤维细胞HS68存活率以探索酵母提取物的安

全性，同时用B16细胞测试样品对黑素生成的影响以研究酵母提取物的功效性。结果：米

酒来源破壁WAE对HS68细胞的安全浓度范围为酵母提取物有效浓度M≤0.1%，浓度在

0.1%、0.01%时，对HS68细胞增殖作用分别为6.36、9.33%；WAE对B16细胞的安全浓度

范围也为有效浓度M≤0.1%。与不含WAE组相比，WAE浓度在0.1%、0.05%、0.01%时，

对黑素生成抑制率分别为69%（P＜0.05）、52%（P＜0.05）、20%（P＜0.01）。与相同浓度

日本酵母提取物（E100）、普通国产酵母提取物（HY）相比较，WAE酵母提取物的细胞安

全性与黑素抑制效果优于E100、HY。结论：WAE在安全浓度范围内具有促进成纤维细胞

增殖和抑制黑素生成的作用。

关键词：酵母提取物、成纤维细胞、黑素、安全性、功效性

酵母提取物来源于天然酵母，富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成

分。《本草纲目》里记载，米酒具有行药势，杀百邪恶毒气，通血脉，养脾气，厚肠胃，散

湿气，润皮肤等功效，将米酒列为药酒的首位。因此，米酒来源的酵母提取物应用于化妆品

［1-4］

的前景是值得期待的。

本研究中的酵母提取物（WAE）样品是一种米酒来源破壁酵母精华萃取液，来源于米

酒酒糟的天然酵母菌，经过特殊处理工艺将酵母破壁后抽提其中的蛋白质、核酸、维生素等，

1作者简介:廖峰(1981－)，男，成都人，博士，电话:

基金项目：四川省科技成果转化平台建设项目(申报编号：14CGPT0029；计划编号：2014GPTZ0008

再经生物酶解的获得的终产品。我们将通过CCK-8法检测成纤维细胞存活率以探索酵母提

取物的安全性，并用B16细胞测试样品对黑素生成的影响以研究酵母提取物的美白功效。

同时，将样品与啤酒来源的已经商品化的日本酵母提取物（HydrolyzedYeast:HY）与国产

酵母提取物（E100）进行对比，为该样品应用于化妆品提供科学数据。

1实验部分

1.1主要试剂和仪器

1.1.1试剂耗材：

米酒来源破壁酵母精华萃取液（WAE，有效浓度4.2%，上海辉文生物技术有限公司），

啤酒来源日本酵母提取物（HydrolyzedYeast:HY，有效浓度5.6%，日本进口）,啤酒来

源酵母提取物（E100，有效浓度5.0%，国产），100mm培养皿(Corning，美国)，24孔培养

板(Corning，美国)，DMEM培养基（Hyclone，美国），1640培养基（Hyclone，美国），胎

牛血清（fetalcalfserum，FBS，Hyclone，美国），细胞消化液（含终浓度为0.25%的胰蛋白

酶和0.02%EDTA的混合液）；PBS（磷酸盐缓冲液，Solarbio）；CCK-8检测液（Dojind，日

本）。

1.1.2仪器：

860型酶标仪（Bio-Rad，美国）；311型CO2培养箱（Thermo，美国）；IX71型倒

置荧光显微镜（Olympus，日本）；SW-CJ-1F型超净工作台（苏净安泰）；SC-2546型低

速离心机（中佳公司）；低温高速离心机（Epp