血管增生疾病.pptVIP

三、血管新生抑制因子内源性血管生成抑制因子：☆蛋白质家族中的一些成员丝氨酸蛋白酶抑制剂家族（serineproteinaseinhibitor，serpinsuperfamily）中的PEDF，KBP，antithrombin，maspin等，以PEDF为例介绍该类抑制剂的特点☆蛋白质大分子前体的水解产物angiostatin，K5，endostatin，tumstatin等以K5为例第31页，讲稿共66页，2023年5月2日，星期三PEDF（pigmentepithelium-derivedfactor）☆1989年由Tombran-Tink从胎儿视网膜色素上皮细胞培养液中分离出来，视网膜基质中以较高浓度存在☆分子量50KD，基因位于染色体17p13☆属于丝氨酸蛋白酶抑制剂基因家族,但不具备抗蛋白酶活性☆神经亲和保护作用；抑制血管增生第32页，讲稿共66页，2023年5月2日，星期三1.PEDF的抑制血管增生活性☆Dawson于1999年首次发现PEDF具有很强的抑制血管增生的作用,是维持角膜，玻璃体等眼内组织无血管形成的主要原因☆是血管生成最有效的天然抑制剂，比血管抑素、内皮抑素活性更高☆Gao等在视网膜新生血管大鼠模型中检测到视网膜组织VEGF的含量较正常对照组升高5倍，PEDF的含量下降了2倍，显示出在视网膜病理新生血管形成中，血管抑制剂与血管刺激剂之间的平衡被打破第33页，讲稿共66页，2023年5月2日，星期三2.PEDF抗血管增生机制☆PEDF促进血管内皮细胞凋亡☆体外实验,人血管内皮细胞培养液中凋亡阳性细胞数随PEDF剂量的增加而增加☆体内实验,PEDF处理的高氧动物的视网膜凋亡内皮细胞与未处理相比高8倍，对已存在的正常血管内皮细胞无反应，说明PEDF仅对活化的血管内皮细胞起作用第34页，讲稿共66页，2023年5月2日，星期三☆PEDF与胶原蛋白－?和肝素有高度亲和性，提示PEDF可能作用于细胞粘附分子，即靶向细胞外基质来调节其抑制血管内皮细胞增生的活性☆与其他血管因子的相互作用：PEDF下调VEGF表达；K5上调PEDF、下调VEGF表达☆机制尚有许多疑问：是否存在PEDF特异性受体；PEDF抑制内皮细胞的信号转导通路等第35页，讲稿共66页，2023年5月2日，星期三3.PEDF与肿瘤的关系☆PEDF抗肿瘤活性：诱导肿瘤细胞分化；抑制血管生成；促进Schwann细胞及神经节细胞产生更多的PEDF，可能是神经母细胞瘤自然好转的缘故☆前列腺癌组织中PEDF含量显著下降或缺如☆在黑色素瘤细胞系中首次检测到PEDF基因的缺失☆PEDF基因和p53基因均位于染色体17p13.1,肿瘤发生与该区域关系密切,提示PEDF基因可能是抑癌基因或是肿瘤相关基因第36页，讲稿共66页，2023年5月2日，星期三4.PEDF治疗血管增生性眼病☆Stellmach等腹腔内注射重组PEDF显著抑制了早产性视网膜病（ROP）小鼠模型的视网膜血管增生☆Mori等在三种不同的眼血管增生模型中眼内输送AdPEDF取得显著疗效：激光诱导的色素膜损伤所致脉络膜新生血管(CNV)鼠模型；rhodopsin/VEGF转基因鼠；ROP小鼠模型☆AdPEDF眼内输送不仅抑制视网膜和脉络膜新生血管形成，还可逆转已形成的新生血管☆FDA批准PEDF基因治疗进入Ⅰ期临床试验（2003年）第37页，讲稿共66页，2023年5月2日，星期三K5（plasminogenkringle5）1.K5结构特点：第38页，讲稿共66页，2023年5月2日，星期三第39页，讲稿共66页，2023年5月2日，星期三☆人纤溶酶原是分子量为92kD的糖蛋白，由5个通过二硫键连接的联环结构域（kringle）构成，每个联环结构域由80个氨基酸组成，含3个二硫键，形成双环状构象☆纤溶酶原水解片段K1、K2、K3、K5、K1-3、K1-4、K2-3等均能抑制内皮细胞增生，K4不具有抗增殖活性，却有明显抑制内皮细胞迁移的作用☆K1-4即血管抑制素，angiostatin☆K5是抑制内皮细胞增殖和迁移最有效的纤溶酶原片断第40页，讲稿共66页，2023年5月2日，星期三☆K5是血纤溶酶原中与血管抑素相连的联环结构域，由80个氨基酸残