抗生素发酵生产工艺.pptVIP

*③细胞融合技术法对抗生素产生菌采用细胞融合技术的成果更为突出。橄榄色无孢小单孢菌细胞融合株抗生素产率比原菌株提高140倍。目前DNA重组技术已广泛用于红霉素、链霉素等20多种抗生素的育种工作，可以预见不久将来会有更多的由“工程菌”生产的新型抗生素问世。第22页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三*2、化学合成法根据某种抗生素的化学组成和结构，通过化学合成的方法，可生产部分抗生素。如：氯霉素、磷霉素等。经过化学合成方法和控制条件的不断深入研究，越来越多的抗生素可用化学合成法生产。第23页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三*3、生物合成加化学合成法许多细菌逐渐出现了抗药性，已经证实某些抗药性因子位于细菌内的质粒上，质粒可以在细菌之间转移，结果抗性菌日益增多，抗生素疗效就越来越低。为了对付细菌的抗药性，科学家对原有的抗生素进行了“整容手术”，细菌因再无法识别改头换面的抗生素而被抑制或杀死。现在已能使用克隆了酰化酶基因的“工程菌”（大肠杆菌）高效率的生产半合成抗生素。临床现在使用的贵重特效药物先锋霉素（头孢菌素类）、氨苄青霉素，就是这类半合成抗生素类药物。国外已有几十种这类药物在实验室研制成功。第24页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三*抗生素制备的一般流程图菌种孢子制备种子制备发酵发酵液预处理及种子加滤提取及精制成品检验前体发酵阶段提取阶段成品包装第25页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三*5青霉素概述第26页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三*青霉素的理化性质青霉素本身为一元酸，可与钾、钠、镁、钙、铝和铵等化合成盐类。易溶于水，游离酸易溶于醇、酮、醚、酯等一般有机溶剂。游离酸或盐类的水溶液均不稳定，极易失去抗菌效力。不耐热，一般保存于冰箱中，但青霉素盐的结晶纯品，在干燥条件下可于室温保存数年。青霉素的抗菌效力与其分子中的β-内酰胺环有关。第27页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三*抗菌作用和临床应用青霉素主要抑制G+菌，但对某些G-菌，螺旋体及放线菌也有强大的抗菌作用，青霉素的抗菌作用与抑制细胞壁的合成有关。青霉素临床上用于治疗葡萄球菌传染症如脑膜炎、化脓炎、骨髓炎等，溶血性链球菌传染症如腹膜炎、产褥热，以及肺炎、淋病、梅毒和炭疽等。第28页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三*菌种：产黄青霉生长发育分七个阶段：Ⅰ—Ⅳ期：菌丝生长期，适宜做种子；Ⅳ—Ⅴ期：青霉素分泌期；Ⅵ期：菌丝体自溶期。5.1青霉素生产菌的特性点青霉第29页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三*青霉素产生菌的生长过程分生孢子发芽期菌丝繁殖期脂肪粒形成期脂肪粒减少，小空孢大空孢自溶菌丝生长期青霉素分泌期菌丝自溶期第30页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三 第1期：分生孢子萌发，具有小泡。 第2期：菌丝繁殖，嗜碱性，类脂肪小颗粒。 第3期：脂肪包涵体，贮藏物，嗜碱性很强。 第4期：空泡，嗜碱性减弱，开始产生抗生素。 第5期：大空泡，中性染色大颗粒，脂肪包涵体 消失，青霉素产量最高。 第6期：个别细胞自溶，胞内无颗粒，释放氨， pH上升。 第7期：菌丝完全自溶，仅有空细胞壁。发酵培养下的生长过程及细胞学变化第31页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三 镜检控制规定时间取样，显微镜观察7个时期的态变化，控制发酵。1－4期为菌丝生长期，3期的菌体适宜种子。4－5期为生产期，生产能力最强，通过工程措施，延长此期，获得高产。第6期到来之前结束发酵。第32页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三带放补料工6.1青霉素生产流程结晶器种子罐1和2米孢子预处理罐过滤器发酵罐萃取器蒸发器工业盐提炼工艺艺发冷冻干燥孢子琼脂斜面酵 培养基制备无菌空气冷至15℃6.青霉素发酵工艺过程第33页，讲稿共56页，2023年5月2日，星期三(1)、生产孢子制备斜面种子：砂土孢子用甘油、葡萄糖、蛋白胨组成的固体培养基进行培养，最适温度25-26℃，培养6-8天，形成单菌落。再传斜面，培养7天，形成绿色斜面孢子。 米孢子：移植到小米或大米固体培养基 上，生长7天，25℃ 注意：每批孢子必需