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蛋白质纯化试验室
试验手册
第一章外源基因在大肠杆菌中的表达
一、通过聚合酶链式反响〔PCR〕将靶基因亚克隆到质粒载体上
〔一〕PCR引物设计的根本原则与PCR反响组分和条件
PCR引物设计的根本原则
引物与靶基因间配对的碱基一般为15-20。
引物碱基尽可能随机分布，避开消灭嘌呤、嘧啶积存现象，引物G+C
含量宜在45-55%左右。
引物内部不应形成二级构造，两个引物之间尤其在3’末端不应有互补链存在。
引物的碱基挨次不应与非扩增区域有同源性。可用计算机进展关心检索分析。
引物3’末端一般以单个C或G
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