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基因工程抗体制备原理

基因工程抗体制备的基本原理涉及从人体或其他生物源获取目

标蛋白质，然后将其基因导入表达宿主，通过宿主细胞表达和分泌抗

体。以下是基因工程抗体制备的主要步骤和原理：

1.选择目标抗原：

•从目标生物体中选择需要制备抗体的蛋白质（抗原）。这可以

是生物体自身产生的蛋白质，也可以是外源蛋白质，例如病原体的蛋

白。

2.克隆抗原基因：

•从生物体中提取RNA或DNA，通过反转录和PCR等技术获得抗

原基因的DNA序列。

3.构建表达载体：

•将抗原基因插入表达载体中。表达载体通常包括启动子、终止

子、选择标记等元件，以便在宿主细胞中进行高效的基因表达。

4.转染或转化宿主细胞：

•将构建好的表达载体导入宿主细胞。这可以通过转染（对于体

外细胞系）或转化（对于微生物，如大肠杆菌）实现。

5.表达和分泌抗原：

•在宿主细胞内，通过转录和翻译，抗原基因被表达成蛋白质。

如果使用的是分泌表达系统，抗原会被导入到细胞外。

6.收集和纯化抗原：

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•从培养基或细胞中收集并纯化目标抗原。这可能涉及到各种蛋

白质纯化技术，如亲和层析、离心、电泳等。

7.选择合适的抗体制备方法：

•选择适当的抗体制备方法，通常分为多种方式，包括：

•小鼠单克隆法：将抗原注射到小鼠体内，从免疫小鼠的脾脏

中收集B细胞，然后与肿瘤细胞融合形成杂交瘤，最终得到单克隆抗

体。

•鸡或兔多克隆法：将抗原注射到鸡或兔体内，收集其血清中

的多克隆抗体。

8.抗体纯化和鉴定：

•通过蛋白质纯化技术，如蛋白A/G层析，将混合的抗体纯化。

然后，通过免疫学或生物化学方法，鉴定和验证抗体的特异性和亲和

力。

9.抗体的应用：

•制备的抗体可以用于多种应用，如生物学研究、生物医学诊断、

治疗等领域。

这些步骤构成了基因工程抗体制备的基本流程。这一方法允许定

向制备大量高质量的抗体，以满足科学研究和医学应用的需求。

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