DB63T 1269-2014动物疫病监测样品采集、保存及运送技术规范.docxVIP

ICS11.220

B41

备案号：41686-2014

青海省

地

DB63

方标准

DB63/T1269—2014

动物疫病监测样品采集、保存及运送技术规范

2014-03–03发布

2014-03-15实施

青海省质量技术监督局发布

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DB63/T1269—2014

前言

本标准的编写符合GB/T1.1—2009给出的规则。

本标准由青海省农牧厅提出并归口管理。

本标准起草单位：青海省动物疫病预防控制中心。

本标准起草人：傅义娟、王生祥、王云平、林元清、李秀英、齐青丽、都占林、盛宗华。

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DB63/T1269—2014

动物疫病监测样品采集、保存及运送技术规范

1范围

本标准规定了动物疫病监测样品(病料)的采集注意事项、采样前的准备工作、样品采集及保存、样品编号、采样单填写、样品运送方法。

本标准适用于病原学、血清学、组织病理学等实验室检测、诊断所需样品(病料)的采集、保存和送检。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T18635动物防疫基本术语

GB/T18639狂犬病诊断技术

GB/T18935口蹄疫诊断技术

NY/T765高致病性禽流感样品采集、保存及运输技术规范

3术语和定义

下列术语和定义适应于本标准。

3.1动物疫病监测

调查动物群体中某种疫病或病原的存在情况。

3.2样品

取自动物或环境，拟通过检验反映动物个体、群体或环境有关状况的材料或物品。3.3病料

来自患病或可疑患病动物的被(待)检材料。

4采样注意事项

4.1谨慎取样：遇有病死动物，先排除炭疽后，再进行解剖取样。

4.2及时取样：动物死后应尽快剖检取样，否则尸体腐败，难以采到合格的样品。4.3无菌取样：采样所需器具均应事先消毒，不同病料不得混装于同一容器内。4.4合理取样：取材时应根据不同的疫病和检验目的，采取相应的病料。

4.5注意安全：采样时，应注意个人的安全防护，同时也要注意防止污染周围环境。

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DB63/T1269—2014

5采样前的准备工作

5.1器械准备

冷藏箱、解剖刀，剪刀，镊子，酒精灯，酒精棉，注射器、试管、离心管、试管架、平皿、西林瓶、样品袋、玻片、无菌棉拭子、冰袋、封条、探杯等。

5.2器械消毒

采样用具事先应煮沸或高压灭菌。

5.3记录用品

不干胶标签、签字笔、记号笔、采样单、记录本等。

5.4保存液

阿氏液、50%甘油盐水缓冲液、pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS液)，10%福尔马林固定液。5.5人员防护用具

防护服、防护帽、一次性口罩、一次性手套、护目镜、胶鞋等。

6样品采集及保存

6.1血液

6.1.1采血部位

猪常用采血部位是耳缘静脉和前腔静脉；禽类可在翅静脉或心脏采血；牛、羊常在颈静脉采血，牛也可在尾静脉采血；兔可从耳背静脉、颈静脉或心脏采血；啮齿类动物可从尾尖采血，也可从眼窝内的血管丛采血。

6.1.2采血方法

对采血部位剪毛或拔毛，先用碘酒消毒，再用75%酒精脱碘，采血完毕，用干棉球压迫止血。

6.1.3血液样品的制备

6.1.3.1血清

待血液凝固，血清自然析出后取出。也可用离心机2500r/min~3500r/min离心5min~8min。若能及时检测，可将血清放于0℃~4℃冰箱冷藏，若暂时不检测，须置-20℃冰箱冷冻保存，但要避免反复冻融。

6.1.3.2全血(抗凝血)

样品中加入抗凝剂。抗凝剂可用阿氏液、5%枸橼酸钠溶液等，也可将血液放入装有玻璃珠的灭菌瓶内，振摇脱去纤维蛋白。全血样品不能冻结保存，以防溶血。

6.2组织脏器

6.2.1用于病原分离的组织样品

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以无菌技术采集组织样品，分别放入灭菌容器内，标记后冷藏送往实验室。

6.2.2用于病理组织学检验的组织样品

样品必须新鲜，选取病变典型的部位，连同健康组织一同用锋利的刀具切下，立即放入10倍于组织块的10%福尔马林溶液中固定。固定器具避免使用金属材质。组织块厚度不超过0.5cm，面积在2cm2~3cm2之间。组织块切忌挤压、刮摸和用水洗。如作冷冻切片用，则将组织块放在0℃~4℃容器中，尽快送往实验室。

6.3牛、羊O-P液(食道-咽喉部位分泌物)

被检动物在采样前禁食(可饮水)12h，以免反刍胃内容物严重污染O-P液。采样探杯在使用前经0.2％柠