最新实验八核仁组织者区(NOR)的银染显示法.pdfVIP

最新实验八核仁组织者区(NOR)的银染显示法.pdf

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核仁组织者区〔NOR〕

核仁组织者区〔NOR〕

的银染显示法

的银染显示法

实验目的

实验目的

实验原理

实验原理

实验步骤

实验步骤

作业

作业

实验目的

实验目的

n掌握核仁组织者区〔NOR〕的快

n掌握核仁组织者区〔NOR〕的快

速银染显示法,并了解NOR在细

速银染显示法,并了解NOR在细

胞中分布情况。

胞中分布情况。

实验原理

实验原理

n染色体上为5.8SrRNA、18SrRNA和28SrRNA编

n染色体上为5.8SrRNA、18SrRNA和28SrRNA编

码的基因〔rDNA〕所在的部位,称为核仁组成

码的基因〔rDNA〕所在的部位,称为核仁组成

区〔NOR〕。在间期细胞中,这一区域的染色

区〔NOR〕。在间期细胞中,这一区域的染色

质,参与形成核仁,由于核仁直至前期结束才完

质,参与形成核仁,由于核仁直至前期结束才完

全消散,所以这一局部染色质常常来不及完全收

全消散,所以这一局部染色质常常来不及完全收

缩,在中期染色体上,比其它染色质更疏松,因

缩,在中期染色体上,比其它染色质更疏松,因

而被淡染,即表现为次缢痕结构。

而被淡染,即表现为次缢痕结构。

n每个染色体组中,常有多个NOR。例如人的23

n每个染色体组中,常有多个NOR。例如人的23

对染色体中,有5对端部着丝点染色体短臂的次

对染色体中,有对端部着丝点染色体短臂的次

5

缢痕处为NOR。然而,并不是所有的NOR随时

缢痕处为NOR。然而,并不是所有的NOR随时

都出于转录之中。当NOR在间期转录时,产生

都出于转录之中。当NOR在间期转录时,产生

一种与转录活动有关的酸性蛋白,此蛋白可保存

一种与转录活动有关的酸性蛋白,此蛋白可保存

至中期并能将染液中的银离子复原为金属银而显

至中期并能将染液中的银离子复原为金属银而显

现为黑色。所以银染法可在中期染色体上显示具

现为黑色。所以银染法可在中期染色体上显示具

有转录活性的NOR数目,而且,染色的深黑程

有转录活性的NOR数目,而且,染色的深黑程

度,还可以反响出基因的活性上下。

度,还可以反响出基因的活性上下。

实验方法

实验方法

n银染的具体方法有很多种,如Ag-

n银染的具体方法有很多种,如Ag-

AS法,Ag-I法等,我们在此采用快

AS法,Ag-I法等,我们在此采用快

速银染法,具体操作如下:

速银染法,具体操作如下:

n在染色体标本上滴加含1%甲酸的

n在染色体标本上滴加含甲酸的

1%

2%明胶水溶液3滴,再加50%硝

明胶水溶液滴,再加硝

2%350%

酸银3滴,混合后盖上盖片,将

酸银滴,混合后盖上盖片,将

3

标本置于60℃恒温台上

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