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白藜芦醇合酶基因转化生菜的研究的开题报告

一、研究背景及意义：

白藜芦醇是一种天然的多酚化合物，广泛存在于红葡萄酒、葡萄、花生等植物中，是一种癌症预防物质，同时也有降低血糖、改善心脑血管疾病等多种保健作用。生菜是一种广泛栽培的蔬菜，含有丰富的抗氧化物质和营养成分，是人们日常饮食中的重要组成部分。因此，将白藜芦醇的抗氧化、抗癌等多种保健作用引入生菜中，对提高生菜的营养价值和保健作用具有积极作用。

现有研究表明，白藜芦醇合酶是白藜芦醇生物合成的关键酶，通过转化操作可以将白藜芦醇合酶基因导入到生菜中来实现白藜芦醇的生物合成。因此，本研究将探究白藜芦醇合酶基因转化生菜的可行性，并通过分析表达量的变化等参数来评价转化效果，为提高生菜的保健价值提供理论参考。

二、研究内容和方法：

研究内容：

1.构建含有白藜芦醇合酶基因的表达载体；

2.将构建好的表达载体导入到生菜中，并通过筛选等手段获得转基因生菜；

3.通过PCR、Westernblot等方法检测转基因生菜中白藜芦醇合酶基因的表达量；

4.比较转基因生菜和野生型生菜中白藜芦醇的含量。

研究方法：

1.应用生物信息学技术设计引物，从白藜芦醇合酶基因中扩增所需片段；

2.将扩增得到的白藜芦醇合酶基因片段与表达载体连接，构建出带有白藜芦醇合酶基因的表达载体；

3.利用农杆菌介导转化技术将表达载体导入到生菜中；

4.通过筛选和PCR技术鉴定成功转化的转基因生菜；

5.通过Westernblot技术检测转基因生菜中白藜芦醇合酶基因的表达量；

6.通过高效液相色谱法（HPLC）测定白藜芦醇含量，比较转基因生菜和野生型生菜中白藜芦醇的含量。

三、预期研究成果：

1.成功构建含有白藜芦醇合酶基因的表达载体;

2.成功将构建好的表达载体导入到生菜中，并获得转基因生菜；

3.成功检测出转基因生菜中白藜芦醇合酶基因的表达量，并与野生型生菜进行比较；

4.成功测定出转基因生菜和野生型生菜中白藜芦醇的含量，并进行对比分析；

5.对白藜芦醇合酶基因转化生菜的可行性和影响因素进行分析和总结。